QN4079 SP-瓊脂糖凝膠HP

產品簡介
北京百奧萊博供應的SP-瓊脂糖凝膠HP僅用于生物化學研究方面,本產品質量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多SP-瓊脂糖凝膠HP等分離試劑類產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括SP-瓊脂糖凝膠HP在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:SP-瓊脂糖凝膠HP
英文名稱:SP-Sepharose HP
產品貨號:QN4079
產品規格:100ml
儲存條件:4~28℃
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明膠-瓊脂糖凝膠4FF是采用溴化氰法將明膠耦合到瓊脂糖凝膠4FF基質上的一種親和層析填料。明膠是一種高分子糖蛋白,在多種細胞的表面和許多細胞外液(包括血漿)中都發現了明膠的存在,它可以特異性的結合纖維連接蛋白。明膠瓊脂糖凝膠4FF是專為純化或除去纖維連接蛋白的一種親和層析填料。
技術參數:
基質:高度交聯的4%瓊脂糖凝膠
顆粒大小:45~165μm
平均顆粒大小:90μm
配基:牛明膠衍生物
配基密度:每ml填料約5mg明膠
連接化學基團:CNBr
zuì大流速:200cm/h
耐壓:0.1MPa
pH穩定性:pH3.0~10.0
化學穩定性:所有常用的水相緩沖液
保存液體:20%乙醇
保存溫度:4~8℃
使用方法:
1.準備凝膠
① 讓凝膠和所有的試劑達到工作時的溫度。
② 配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。
③ 明膠瓊脂糖凝膠4FF是保存在20%的乙醇溶液中,取適量凝膠,清洗掉20%的乙醇,抽干。用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。
2.裝柱
① 將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。
② 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。
③ 打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過,使柱床穩定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
3.平衡讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。
4.上樣
① 樣品用平衡液配制,常用磷酸鹽緩沖液或Tris-HCl緩沖液,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。
② 一般情況是讓目標產品結合在柱子上,用平衡液洗去雜質,再選擇一種洗脫液洗下目標產品。
5.洗脫明膠-瓊脂糖凝膠4FF可以采用不同的方式洗脫纖維連接蛋白:
① 使用含有溴鹽的緩沖液,例如溴化鈉或溴化鉀,并在低于平衡緩沖液pH值的條件下洗脫。一種推薦的洗脫緩沖液是:0.05M的醋酸鈉,pH值5.0,含1M的溴化鈉或溴化鉀。
② 可以在平衡緩沖液中加入8 M的脲,來洗脫吸附在凝膠上的纖維連接蛋白。
③纖維連接蛋白還可以通過在平衡緩沖液中添加精氨酸來進行洗脫。
6.再生根據樣品的性質,明膠瓊脂糖凝膠4FF可以再生,以達到重復使用的目的。可以采用2~3柱體積的高pH值(0.1M的Tris-HCl,0.5M NaCl,pH值8.5)的緩沖液和低pH值(0.1M NaAC,0.5 M NaCl,pH值 4.5)的緩沖液交替清洗凝膠。一個周期重復3次,然后用3-5倍柱體積的平衡緩沖液平衡,即可進行下次試驗。如果在純化過程中使用了洗滌劑或變性劑(如8 M尿素),那么這些洗滌劑也可以用于洗脫緩沖液中。2.7清洗在一些應用中,像變性的蛋白質或脂類這樣的樣品,在再生過程沒有被洗脫下來,可以通過加入一些洗滌劑,例如:0.1%的Triton X-100,在37℃的條件下洗一會。立即用至少5倍柱體積的結合緩沖重新平衡。2.8儲存明膠-瓊脂糖凝膠4FF應儲存在4~8℃,20%的乙醇溶液中。特別注意:上樣之前,樣品必須去除色素,否則色素會被吸附到填料上,影響填料的正常使用。
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