QN1221 SABC免疫組化試劑盒

產品簡介
SABC免疫組化試劑盒是高品質的蛋白質研究產品,由北京百奧萊博供應,本產品用于生化實驗研究等領域,SABC免疫組化試劑盒是我司眾多優質蛋白質研究之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括SABC免疫組化試劑盒(小鼠/兔IgG)(FITC)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:SABC免疫組化試劑盒(小鼠/兔IgG)(FITC)
英文名稱:SABC(Mouse/Rabbit IgG)-FITC Kit
產品貨號:QN1221
產品規格:100T-200T
本試劑盒適合于一抗為小鼠或者兔IgG來源的免疫組化實驗,FITC熒光檢測。
SABC是專為免疫組化和其他免疫檢測而設計的,用以顯示組織和細胞中抗原分布。鏈霉親和素(StreptAvidin)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質,同親和素一樣,對生物素有高的親和力,親和素是一個堿性蛋白質(IP=10),經改造后可以轉變成中性蛋白質。鏈霉親和素等電點接近中性,對組織和細胞的非特異吸附很低,基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex,SABC大約可形成一百個左右的FITC和五十個左右的鏈霉親和素所構成的復合物。大量的FITC將保證SABC具有很高的敏感性。
試劑盒組分:
封閉液(5% BSA)———————————10ml
Bio-羊抗小鼠/兔IgG濃縮液——————100ul
SABC-FITC濃縮液-——————————100ul
稀釋液———————————————30ml
抗熒光衰減封片劑——————————10ml
操作步驟:以石蠟切片熱修復為例
1. 切片常規脫蠟至水。
2. 可選步聚:
a、熱修復抗原,將切片浸入0.01M 檸檬酸鈉緩沖液(PH6.0),電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電,間隔5-10分鐘后,反復1-2次。冷卻后PBS(pH7.2-7.4)洗滌1-2次。
b、酶消化,滴加消化液,37℃10分鐘,PBS(pH7.2-7.4)洗滌2-3次。
c、跳過此步,直接進入下一步。
3. 滴加5% BSA封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體, 免洗。
4. 用稀釋液將一抗按一定比例稀釋(稀釋后的一抗4℃可保存一周),也可另行購買抗體稀釋液。滴加稀釋的一抗,37℃ 孵育1小時左右或20℃ 2小時左右,也可4℃過夜。PBS(pH7.2-7.4)洗滌3次,每次2分鐘(一抗的稀釋度、孵育時間和溫度與染色強度、背景有直接關系。一般來說,陽性染色強度不夠時,可提高一抗濃度和延長孵育時間;背景過高時,可降低一抗濃度和縮短孵育時間)。
5. 根據使用量,用稀釋液將Bio-羊抗小鼠/兔IgG濃縮液按1:100稀釋成工作液(1ml稀釋液加入10ul Bio-羊抗小鼠/兔IgG濃縮液,混勻即成工作液,此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠/兔IgG工作液,20-37℃孵育30分鐘。PBS(pH7.2-7.4)洗滌3次,每次2分鐘。
6. 根據使用量,用稀釋液將SABC-FITC濃縮液按1:100稀釋成工作液(1ml稀釋液加入10ul SABC-FITC濃縮液,混勻即成SABC-FITC工作液,此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-FITC工作液,20-37℃孵育30分鐘(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗滌4次,每次5分鐘。
7. 滴加抗熒光衰減封片劑封片。熒光顯微鏡觀察。
對于細胞爬片,固定后,PBS漂洗兩次,再用0.5% Trxiton X-100室溫孵育20分鐘, PBS漂洗兩次,接上述第3步。
對于冰凍切片,固定后,PBS漂洗兩次,再接上述第2步。
注意事項:
如果背景過高,在SABC反應之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗滌切片4次,PBS洗2次,然后封片觀察。
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