ALH223 Pfu DNA聚合酶

產品簡介
Pfu DNA聚合酶的品牌是百奧萊博,是優質的核酸擴增(PCR)產品,本制品用于生化實驗研究等領域,本品質量穩定,價位合理,需要Pfu DNA聚合酶等核酸擴增(PCR)產品的客戶,請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示:包括Pfu DNA聚合酶在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:Pfu DNA聚合酶
英文名稱:Pfu DNA Polymerase
產品貨號:ALH223
產品規格:500U|3000U
本酶用于DNA的高保真擴增,如基因表達克隆、基因定點突變、細胞內基因點突變分析(SNP)和平末端補平等。是從克隆有Pyrococcus furiosis DNA Polymerase 基因的大腸桿菌中分離純化的, Pfu DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性,能糾正DNA擴增過程中產生的堿基錯配。Pfu酶是目前已發現的所有耐高溫DNA Polymerase中出錯率zuì低的。其PCR產物為平端,可直接用平端載體克隆。 高保真PFU對于dNTP純度要求很高,因此建議用本酶配套的超純dNTP mix。本酶濃度為5U/μl。
本品組份(500U):
Pfu DNA Polymerase———————————————500U
10×Pfu Buffer+(with MgSO4)-——————————1ml
SuperPure dNTP mix(10 mM Each)—————————0.2ml
單位定義:一個單位Pfu DNA Polymerase活力定義為在74℃、30分鐘內,以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板引物,將10nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質所需的酶量。
質量控制:SDS-PAGE檢測純度大于99%,經檢測無外源核酸酶活性;PCR方法檢測無宿主殘余DNA,能有效地擴增人基因組中的單拷貝基因;室溫存放一周,無明顯活性改變。
酶貯存緩沖液:50mM Tris-HCl(pH 8.2),0.1mM EDTA,1mM DTT,Stabilizers,50% glycerol。
10×Pfu Buffer (含Mg2+):200 mM Tris-HCl (pH8.8),100 mM KCl,100 mM(NH4)2 SO4,20 mM MgSO4,其他成分。
注意事項:
(1) Pfu酶具有3′-5′的外切酶活性,所以Pfu酶擴增時延伸速度比Taq酶低,應根據擴增產物的長度設置相應的延伸時間,建議Pfu酶的延伸速度為每分鐘1kb 如擴增片段小于4kb;延伸速度為每分鐘0.5kb 如擴增片段大于4kb。同時Pfu酶的3′-5′的外切酶活性可能降解引物, 所以應先加dNTP 后,再加Pfu酶到反應體系中,并立即進行PCR 反應。
(2) 用Pfu酶擴增時,引物的純度要求較高,引物長度大于18個堿基,Tm在55~80℃ 之間,引物濃度在0.1~0.5μM之間,比Taq酶略高。
(3) Pfu酶的熱穩定性比Taq酶好,對于GC含量很高的模板,變性溫度可以提高到98℃,對Pfu酶的活性無影響。
(4) 高保真PFU 對于dNTP純度要求很高,因此建議用本酶配套的超純dNTP mix。
儲存條件:-20℃。
本制品別名:pfu酶
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