SY0406 5ml重力層析空柱

產品簡介
5ml重力層析空柱由專業試劑供應商北京百奧萊博提供,用于科研試驗,我公司專注于蛋白質研究產品的研發、生產和供應,為您提供的5ml重力層析空柱質量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示:包括5ml重力層析空柱在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:5ml重力層析空柱
英文名稱:Gravity Chromatography Columns
產品貨號:SY0406
產品規格:5×1套
百奧萊博提供的重力層析空柱,適用于多種親和層析介質的裝填,以便于后續相應蛋白的純化。本品為5ml 重力層析空柱,總裝填體積5ml。
儲存條件:室溫
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
| BTN120705 | L-谷胱甘肽(還原型) | 5g |
| YT611 | RIPA裂解液(弱) | 100ml |
| YT615 | PMSF(100mM)(苯甲基磺酰fú) | 10ml |
| WE0264 | 植物蛋白提取試劑盒 | 25次|100次 |
| WE0290 | G250蛋白快速染色試劑 | 250ml |
| SNM378 | Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer(還原,2×) | 5ml |
| SNM384 | 考馬斯亮藍G-250 | 5g |
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名稱:細菌膜蛋白質微量提取試劑盒
貨號:BTN100929
規格:50次
本試劑盒是基于超速離心的快速提取細菌膜蛋白的試劑盒。其原理是裂解細胞后,通過超速離心分離出細胞膜和附著的蛋白質。
產品特點:
1.一步式分離細胞膜和膜蛋白,密度梯度離心法簡單快捷。
2. 膜蛋白純度高,能夠去除各種胞漿蛋白的污染,也能去除松散附著在細胞膜上的蛋白,所得膜蛋白主要是整合蛋白。
3. 膜蛋白完整性好,主要是由于實際中有抑制蛋白酶成分。
4. 回收效率高,一般能得到相當于總蛋白量6%的膜蛋白。
5.可用于E.coli,S.typhimurium,K.aerogens,P.aeruginosa,C.crescentus等細菌。
試劑盒組成:
| 成分 | 規格 |
| 溶液A | 125ml |
| 溶液B | 25ml |
| 溶液C | 250ml |
| DNase I干粉 | 3.5mg |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件:低溫運輸和保存,DNase I 需要低溫保存。有效期一年。
使用方法:
準備:次使用本試劑盒時需要將所有DNase I干粉倒入溶液B中,輕柔顛倒使DNase干粉溶解。未用完的部分需要放-20℃保存,zuì好在一個月內完,否則DNase 將逐漸失去活性。此外,zuì好在實驗前1小時將溶液B冰浴預冷。
用法一:小量制備(主要用于上樣量比較小的SDS-PAGE電泳等實驗)
1.收集20-40mL 過夜培養的細菌飽和培養液(OD420在1.5左右即可),2500g室溫離心10分鐘后棄上清。
2.加入2mL溶液A,輕柔吹打,將細菌重懸于溶液A中。
3.2500 g室溫離心10分鐘后棄上清。
4.加入0.5mL溶液B(必須已經提前加入了DNase I干粉),輕柔吹打使細菌重懸。注:如果細菌起始量沒有20-40mL,溶液A的用量可以等比例降低。重懸在溶液A中的細菌可以放-80℃長期保存。
5.用超聲或French Press方法裂解細胞。如果用French Press方法,則需要處理至少兩次,每次的壓力為9.65×10E7(=14000 psi)。注意:不論用哪種裂解方法,都必須在顯微鏡下檢查細菌是否已經裂解,否則還需要重復細菌裂解過程,直到80%以上的細菌都裂解為止。
6.2500g室溫離心8分鐘后小心轉移上清到新的10mL-15mL塑料離心管中(如Beckman Optima 臺式超速離心機離心管),棄沉淀(未破裂細胞)。
7.在上清(細菌裂解液)中加入5mL預冷的溶液C,輕柔顛倒混勻后冰浴放置30-60分鐘。其間可以輕柔顛倒混勻3-5次。
8.用 Bechman Optima 臺式超速離心機115000g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機,但離心力應該一致,否則有可能得不到沉淀。
9.小心移棄上清,在沉淀中加入0.2mL溶液A,充分吹打混勻。
10.用Beckman Optima 臺式超速離心機 115000g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機,但離心力應該一致,否則有可能得不到沉淀。
11.小心移棄上清,所得沉淀放-20℃長期保存,也可以直接加入0.1mL自備的,跟后續實驗兼容的緩沖液(如1×SDS-PAGE上樣液中,可從本公司購買),所得膜蛋白的濃度將在1mg/mL左右。
用法二:大量制備(主要用于上樣量比較大的2D電泳等實驗)
1.收集200-400mL 過夜培養的細菌飽和培養液(OD420在1.5左右即可),2500 g室溫離心10分鐘后棄上清。
2.加入20mL溶液A,輕柔吹打,將細菌重懸于溶液A中。
3.2500 g室溫離心10分鐘后棄上清。
4.加入5mL溶液B(必須已經提前加入了DNase I干粉),輕柔吹打使細菌重懸。注:如果細菌起始量沒有200-400mL,溶液A的用量可以等比例降低。重懸在溶液A中的細菌可以放-80℃長期保存。
5.用超聲或French Press方法裂解細胞。如果用French Press方法,則需要處理至少兩次,每次的壓力為9.65×10E7(=14000 psi)。注意:不論用哪種裂解方法,都必須在顯微鏡下檢查細菌是否已經裂解,否則還需要重復細菌裂解過程,直到80%以上的細菌都裂解為止。
6.2500g室溫離心8分鐘后小心轉移上清到干凈的玻璃燒杯中,棄沉淀(未破裂細胞)。
7.在上清(細菌裂解液)中加入50mL預冷的溶液C,輕輕在冰浴中攪拌混勻30-60分鐘。注:可以在大燒杯中裝冰,然后將裝有樣品的小燒杯放入,在放入干凈的攪拌子,以zuì低速度攪拌。
8.用 Beckman Type 55.2 Ti轉頭 115000g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機,但離心力應該一致。
9.小心移棄上清,在沉淀中加入2mL溶液A,充分吹打混勻。
10.用Beckman Type 55.2 Ti轉頭 115000g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機,但離心力應該一致。
11.小心移棄上清,所得沉淀放-20℃長期保存或溶解在1mL自備的,跟后續實驗兼容的緩沖液(如1×等電點電泳上樣液,可從本公司購買),所得膜蛋白的濃度在1mg/mL左右。
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