WE0281 蛋白銀染試劑盒

產品簡介
蛋白銀染試劑盒的品牌是百奧萊博,是優質的蛋白質研究產品,本制品僅用于生物化學研究方面,我公司專注于蛋白質研究產品的研發、生產和供應,為您提供的蛋白銀染試劑盒質量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示:包括蛋白銀染試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:蛋白銀染試劑盒
英文名稱:Protein Silver Stain Kit
產品貨號:WE0281
產品規格:20次
本試劑盒采用高靈敏度的銀染染料,可應用于變性膠及非變性膠的蛋白染色,具有目的條帶清晰、背景低,操作時間可靈活控制的優點。另外,本試劑盒增加了一步短時敏化作用步驟,可明顯降低背景及提升目的條帶的亮度。
試劑盒組成:
| 組份 | 20次 |
| Silver Stain Sensitizer(500×) | 2×1ml |
| Silver Stain Enhancer | 3ml |
| Silver Stain | 2×250ml |
| Silver Stain Developer | 4×125ml |
注意事項:
1、請提前準備50ml固定液(超純水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脫液(10%乙醇)和50ml終止液(5%的冰醋酸)。
2、操作時請使用去離子水和潔凈的玻璃或塑料器皿,須戴一次性手套進行操作。
3、整個銀染過程需在搖床上進行,搖床轉速約60 rpm左右。
4、需自備乙醇,冰醋酸。
操作步驟:
以下操作步驟中各溶液的用量以大小為8.5×5.5 cm、厚度為1.0 mm的凝膠為例,以凝膠全部浸沒到溶液為準,置于搖床上操作,一般用量25ml。對于大型凝膠,各溶液的使用量需按凝膠體積的比列放大。
請提前準備好50ml固定液(超純水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脫液(10%乙醇)和50ml終止液(5%的冰醋酸)。
1、水洗:電泳完成后,用超純水洗膠2次,每次洗滌5分鐘。
2、固定:用25ml固定液固定凝膠2次,每次固定15分鐘。
3、洗脫:用洗脫液洗膠2次,每次洗滌5分鐘。
4、水洗:用超純水洗膠2次,每次洗滌5分鐘。
5、增敏:將上一步洗好的凝膠置于銀染增敏工作液中,室溫下準確孵育1分鐘后用超純水洗膠3次,每次洗滌20秒。
銀染增敏工作液的配制:取50μl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25ml超純水中,混勻。
6、銀染:棄去超純水,將凝膠置于銀染工作液中孵育30分鐘。
銀染工作液的配制:取25ml Silver Stain加入50μl Silver Stain Enhancer混勻。
7、水洗:用超純水快速洗膠2次,每次洗滌準確控制為20秒。
8、顯影:立即將洗好的凝膠浸沒在顯影液中,室溫孵育2-3分鐘,直至蛋白條帶顯示清晰。
顯影液的配制:取25ml Silver Stain Developer加入30μl Silver Stain Enhancer混勻。
注意:顯影30秒內,蛋白條帶開始顯現,繼續顯影至2-3分鐘。若蛋白條帶顯色較淺,可適當延長顯影時間至5分鐘及以上。
9、終止:用終止液洗去凝膠上的顯影液后,將凝膠浸泡在新的終止液中反應10分鐘。
實驗圖例

BSA蛋白樣品經過10%的SDS-PAGE凝膠電泳后銀染結果
BSA蛋白分子量約為66 kD,上樣量從左到右分別為50ng,10ng,5ng
儲存條件:室溫。
根據您的關注的蛋白銀染試劑盒,您可能還對以下產品有需求:
名稱:3mL親和層析柱
貨號:BTN140650
規格:3mL
本產品適用范圍廣泛,可用于純化分離重組蛋白、抗體和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA結合蛋白等生物大分子;還可以用于去除生物樣品中的內毒素等污染。
親和層析是利用生物分子間所具有的專一親和力而發明的純化技術。它是利用生物分子間存在的特異性相互作用(如抗原-抗體、酶-底物或抑制劑、激素-受體等),通過將具有親和力的兩個分子中的一個固定在不溶性基質上,利用分子間親和力的特異性和可逆性,對另一個分子進行分離純化。
親和層析柱常見的使用方法有重力法、手動加壓法、蠕動泵法,其示意圖如下:

儲存條件:常溫運輸及保存,有效期一年。
常用親和標簽及純化方案:

名稱:超快蛋白銀染試劑盒
貨號:BTN100810
規格:1000mL
核酸銀染的原理是銀離子(Ag+)可與蛋白質等大分子有機物形成穩定的復合物,然后用還原劑如甲醛在堿性環境下使Ag+還原成銀顆粒,可把蛋白電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色,其靈敏度比考馬斯亮藍高100倍。但常規的銀染方法由固定、氧化、染色、顯影、終止等步驟組成,操作十分繁瑣,尤其不適用于大批量實驗。為解決此問題,本公司推出本產品。
產品特點:
1.超快,整個過程只需要不到60分鐘。
2.操作簡單,只有固定(30分鐘)、染色(10分鐘)和顯影(10分鐘)三步。
3.靈敏度比考馬斯亮藍染色高100倍,能檢測到10ng的蛋白質條帶。
4.三個成分中的兩個都是現用現配,可重復性好。
產品組成:
| 成分 | 規格 |
| 溶液A組分一(干粉) | 2g |
| 溶液A組分二,10× | 100ml |
| 溶液A組分三,10× | 100ml |
| 溶液B組分一,10× | 100ml |
| 溶液B組分二 | 5ml |
| 說明書 | 1份 |
注:1000mL規格指可配制的溶液A(染色液)的體積,實際使用次數根據PAGE膠大小不同而不同。
儲存條件:常溫運輸及保存,有效期一年。
自備試劑:去離子水,乙醇和乙酸。
使用方法:
一、配制銀染固定液 100mL(對mini PAGE膠)
將40mL 無水乙醇、10mL 乙酸和50mL去離子水充分混合即可使用。
二、配制溶液A
需要配制的溶液A(染色液)的體積完全跟PAGE膠的大小相關,一般的mini-PAGE膠需要20-30mL。下面的用量是針對配制100mL溶液A。如果配制的溶液A的體積不是100mL,則需按比例改變各成分用量。在一干凈燒杯中加入下列成分攪拌混勻即可。溶液A需要新鮮配制。
| 成分 | 用量 |
| 去離子水 | 80ml |
| 溶液A成分一 | 0.2g |
| 溶液A成分二 | 10ml |
| 溶液A組分三 | 10ml |
三、配制溶液B
需要配制的溶液B(顯色液)的體積完全跟PAGE膠的大小相關,一般的mini-PAGE膠需要20-30mL。下面的用量是針對配制100mL溶液B。如果配制的溶液B的體積不是100mL,則需按比例改變各成分用量。在一干凈燒杯中加入下列成分攪拌混勻即可。溶液B需要新鮮配制。
| 成分 | 用量 |
| 去離子水 | 89.5ml |
| 溶液B成分一 | 10ml |
| 溶液B組分二 | 0.5ml |
四、銀染
1.PAGE電泳或SDS-PAGE電泳結束后,將膠轉移到裝有100mL銀染固定液的瓷盤中,搖晃30分鐘以去除干擾銀染的成分(如甘氨酸、SDS、DTT、甘油等)。注:此步很重要,否則銀染背景很高。
2.用100mL去離子水漂洗2次,每次2分鐘。
3.將PAGE膠轉移到適當體積的溶液A中,使溶液A在輕柔搖晃過程中能夠淹沒PAGE膠。室溫搖晃處理10分鐘。
4.倒掉溶液A,用100mL去離子水快速漂洗2次,每次半分鐘。
5.將PAGE膠轉移到適當體積的溶液B中,使溶液B在輕柔搖晃過程中能夠淹沒PAGE膠。室溫搖晃直到蛋白電泳條帶顯現(一般需要10分鐘左右)。
6.迅速將PAGE膠置于適當背景下照相留存。膠的顏色肯能會逐漸加深,如果有必要保存膠,可以用自備的5%的乙酸終止顯色。

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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
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