SY0153 NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒
- 產(chǎn)品/服務(wù)：SY0153 NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒
- 型 號：SY0153
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價(jià)：面議
- 更新日期：2023-05-31
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數(shù)：1080
產(chǎn)品簡介
NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于科研目的，NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒是我司眾多優(yōu)質(zhì)報(bào)告基因檢測之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示：包括NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱：NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒
英文名稱：NF-κB GFP Reporter Plasmid
產(chǎn)品貨號：SY0153
產(chǎn)品規(guī)格：1μg
NF-κB-GFP報(bào)告基因是用于檢測NFκB轉(zhuǎn)錄活性水平為目的的報(bào)告基因。 NF-κB基因在炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答和抑制細(xì)胞凋亡等方面有著重要的作用。
NF-κB-GFP報(bào)告基因主要應(yīng)用于NF-κB信號通路的研究和基于NF-κB信號通路的藥物研究以及癌細(xì)胞中NF-KB的調(diào)控機(jī)制的研究。
pGMNF-ΚB-GFP是我公司改造后的哺乳動(dòng)物真核表達(dá)載體，在其多克隆位點(diǎn)插入了多個(gè)NF-κB結(jié)合位點(diǎn)，可以地檢測NF-κB的激活水平。由于載體采用了GFP作為報(bào)告基因，更便于后續(xù)的檢測。同時(shí)，對載體中預(yù)測出的其它轉(zhuǎn)錄因子以外的結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行了適當(dāng)?shù)耐蛔儯黾恿速|(zhì)粒的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合特異性。另外，由于質(zhì)粒體積減小，使得NF-κB-GFP報(bào)告基因更易于轉(zhuǎn)染。
質(zhì)粒圖譜
pGMNF-κB -GFP質(zhì)粒測序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用說明
pGMNF-κB -GFP可以采用常規(guī)轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞。
TNF-α、IL-1β和LPS等是常見的NF-κB激活劑，可作為NF-κB報(bào)告基因的陽性對照。
注意事項(xiàng)
1）本質(zhì)粒未經(jīng)我公司允許不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人實(shí)驗(yàn)室以外的任何人或單位。
2）為了您的健康，實(shí)驗(yàn)操作時(shí)請穿實(shí)驗(yàn)服和帶一次性手套。
儲存條件：-20℃。
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名稱：螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒(海腎)
貨號：YT272
規(guī)格：100次|1000次
本試劑盒是一種以腸腔素為底物來檢測海腎螢光素酶，簡稱renilla luciferase活性的試劑盒。
海腎螢光素酶是一種分子量約為36kD的蛋白，在氧氣存在的條件下，可以催化Coelenterazine氧化成Coelenteramide。在Coelenterazine氧化的過程中，會發(fā)出生物螢光。生物螢光可以通過化學(xué)發(fā)光儀或液閃測定儀進(jìn)行測定。本試劑盒的檢測原理參考下圖。
海腎螢光素酶的檢測原理圖。
通過螢光素和螢光素酶這一生物發(fā)光體系，可以非常靈敏、地檢測基因的表達(dá)。通常把感興趣基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或5’啟動(dòng)子區(qū)克隆在luciferase的上游，或把3’-UTR區(qū)克隆在luciferase的下游等，構(gòu)建成報(bào)告基因質(zhì)粒。然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞，用適當(dāng)藥物等處理細(xì)胞后裂解細(xì)胞，測定螢光素酶活性。通過螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。海腎螢光素酶一方面常用作螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測的內(nèi)參，以消除由于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率不同而帶來的誤差；另一方面海腎螢光素酶也可以和螢火蟲螢光素酶一樣被用于常規(guī)的報(bào)告基因檢測。海腎螢光素酶催化Coelenterazine發(fā)光的zuì強(qiáng)發(fā)光波長為465nm。
注意事項(xiàng)：
1. 為取得zuì佳測定效果，在用單管的化學(xué)發(fā)光儀測定時(shí)，樣品和測定試劑混合后到測定前的時(shí)間應(yīng)盡量控制在相同時(shí)間內(nèi)，例如30秒內(nèi)；使用具有化學(xué)發(fā)光測定功能的多功能熒光酶標(biāo)儀時(shí)，宜先把樣品全部加好，然后統(tǒng)一加入海腎螢光素酶檢測工作液。
2. 由于溫度對酶反應(yīng)有影響，所以測定時(shí)樣品和試劑均需達(dá)到室溫后再進(jìn)行測定。
3. 樣品和測定試劑混合后，必須等待1-2秒，再進(jìn)行測定。測定時(shí)間通常為10秒，根據(jù)情況也可以測定更長或更短時(shí)間，但是同一批樣品宜使用相同的測定時(shí)間。
4. 海腎螢光素酶檢測底物(100×)配制在無水乙醇中。由于無水乙醇容易揮發(fā)，有時(shí)會在初次使用時(shí)發(fā)現(xiàn)體積明顯小于100μl的情況，此時(shí)用無水乙醇把體積補(bǔ)足至100μl，并混勻后即可使用。
5. 海腎螢光素酶檢測工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用，-20℃可以保存一周。隨著保存時(shí)間的延長檢測效果會不斷下降，因此不可配制成工作液后長期保存。
6. 為避免由于質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞時(shí)效率的差異而帶來的誤差，可以同時(shí)轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)奈灮鹣x螢光素酶的報(bào)告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參，采用百奧萊博的雙螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒(YT272)進(jìn)行檢測；也可以同時(shí)轉(zhuǎn)入β-半乳糖苷酶報(bào)告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參，然后采用百奧萊博的β-半乳糖苷酶報(bào)告基因檢測試劑盒(YT274)進(jìn)行檢測。采用本試劑盒中的報(bào)告基因細(xì)胞裂解液裂解獲得的樣品可以直接用于β-半乳糖苷酶報(bào)告基因檢測試劑盒(YT274)的檢測。
儲存條件：-20℃，有效期一年。
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