GL2511 乙醇脫氫酶(ADH)提取液
- 產品/服務：GL2511 乙醇脫氫酶(ADH)提取液
- 型 號：GL2511
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-02
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：833
產品簡介
北京百奧萊博供應的乙醇脫氫酶(ADH)提取液用于科研試驗，本產品質量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多乙醇脫氫酶(ADH)提取液等蛋白質研究產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括乙醇脫氫酶(ADH)提取液在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：乙醇脫氫酶(ADH)提取液
產品貨號：GL2511
產品規格：500ml
用途：
主要用于裂解植物組織，提取樣品中的乙醇脫氫酶
注意事項：
乙醇脫氫酶(Alcohol dehydrogenase，ADH)的系統名為乙醇：輔酶I氧化還原酶(alcohol：NAD+ oxidoreductase)，大量存在于人和動物肝臟、植物及微生物細胞之中，是一種含鋅金屬酶，具有廣泛的底物特異性。乙醇脫氫酶夠以煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)為輔酶，催化伯醇和醛之間的可逆反應： CH3CH2OH+ NAD+→ CH3CHO +NADH+ H+。在人和哺乳動物體內，乙醇脫氫
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
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名稱：動植物膜蛋白微量制備試劑盒
貨號：BTN91204
規格：50次
細胞膜蛋白質參與了很多重要的細胞活動，根據它們與膜結合的位置一般分為兩種，一種是附著在細胞膜上，另一類是嵌入到細胞膜中間。附著型膜蛋白疏水性較弱，比較容易提取和純化；而嵌入型膜蛋白疏水型很強，所以在水溶液里面很難溶解，非常難以提取和純化。百奧萊博根據上述特點，經過精心優化的、開發出本產品，專門用于分離純化這兩種膜蛋白。
產品特點：
1. 兩步法提取，先純化含膜組分，再分離附著型膜蛋白和嵌合型膜蛋白。
2. 膜蛋白(附著型+嵌入型)產量高，對肝臟組織而言，其線粒體膜蛋白產率為10μg/mg左右，過氧化物酶體為1μg/mg左右，內質網為25-30μg/mg。
3. 所得的膜蛋白大部分具有生物活性，可用于活性研究。
4.可用動物、植物培養細胞和實體細胞為材料，也可用預先純化的含膜組分或細胞器(如線粒體、葉綠體、內質網、過氧化物酶體)為材料(本試劑盒不含純化細胞器的試劑)。
5. 本方法重復性好。
6. 本試劑盒足夠50次微量提取，分A型和B型兩種。A型用于附著型膜蛋白，B型用于嵌合型膜蛋白和附著型膜蛋白。
試劑盒組成：
| 成分 | A型 | B型 |
| 溶液A | 100ml | 100ml |
| 溶液B | 10ml | 10ml |
| 溶液C | 50ml | 100ml |
| 說明書 | 1份 | 1份 |
儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。
使用方法：
1. 對培養細胞：收集1×107個培養細胞(動物細胞、植物細胞)，用20mL自備的冰浴的PBS 洗滌三次，每次洗滌后需要4℃下1000 g離心2分鐘，然后小心棄上清。對實體組織：由于各種動植物的各種實體組織的屬性差別太大，故本手冊的純化膜組分的操作步驟(第1-7 步)不一定完全適合，用戶需要自行優化以純化含膜組分或含膜的細胞器(如細胞質膜、內質網、線粒體、葉綠體等)，再將含膜組分或細胞器沉淀直接用于第8 步的膜蛋白提取。
2. 將洗滌后的細胞沉淀重懸在2mL溶液A中，冰上靜置10分鐘。注意：膜蛋白有膜的保護，在純化過程中對蛋白酶的降解沒有胞漿蛋白敏感，一般可以不加蛋白酶抑制劑。但如果純化的膜蛋白的確有降解的話，可以在溶液A中加入自備的蛋白酶抑制劑混合物。
3.轉移到容積為2mL的Dounce 玻璃勻漿器上下勻漿20-50次(具體次數取決于細胞種類，293T細胞一般需要20次左右，而MEF細胞一般需要50次左右。zuì好用樣品行預實驗以摸索zuì佳勻漿次數，zuì佳勻漿次數時在顯微鏡下能看見細胞破裂但細胞核完整)。
4. 將勻漿液轉移到15或50mL塑料管中，加入相當于勻漿液體積1/10的溶液B，其間可以輕柔顛倒混勻3-5次，留少量樣品作為對照1(勻漿液)。
5. 4℃ 2500rpm離心20分鐘，沉淀為細胞核，上清為胞漿和膜成分，留少量樣品作為對照2(胞漿和膜成分)。
6. 將上清液用Beckman Optima 臺式超速離心機100,000 g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機，但離心力應該為100,000g，否則有可能得不到膜成分沉淀。
7.小心轉移上清(胞漿部分)并留少量樣品作為對照3(胞漿)。
8. 將沉淀(含膜組分)重懸于1mL 冰浴的溶液C中后，冰上靜置30分鐘，留少量樣品作為對照4(膜成分)。本成分電泳前，需要先用自備的TCA沉淀(TCA 終濃度為10%)，再用冰冷的丙酮洗滌兩次后再溶解在1×上樣液中待用。對照1-3 號不需要這樣的預處理。
9. 用Beckman Optima 臺式超速離心機100,000g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機，但離心力應該一致，否則有可能得不到沉淀。
10. 如果需要附著型膜蛋白，則取上清(含附著型膜蛋白)棄沉淀(含膜和其中的嵌合型膜蛋白)。上清可以放-20℃長期保存，如果需要電泳，需要先用自備的TCA沉淀(TCA 終濃度為10%)，再用冰冷的丙酮洗滌兩次后再溶解在1×上樣液中與對照1-4 號一起上樣電泳。
11. 如果需要嵌合型膜蛋白，則取出上清(含附著型膜蛋白)并留少量樣品作為附著型膜蛋白樣品，然后再用1mL 冰浴的溶液C重懸沉淀，然后100,000g 4℃離心60分鐘，去掉上清(上清含殘留的附著型膜蛋白，可以留樣作為洗滌后的附著型膜蛋白樣品)。沉淀含膜和其中的嵌合型膜蛋白。如果需要測定膜蛋白的濃度，則將其溶解在自備的0.5 M NaOH溶液。
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