BTN131134 Percoll

Percoll由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供,僅用于生物化學(xué)研究方面,我公司的Percoll品質(zhì)上佳,經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn),已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
特別提示:包括Percoll在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:Percoll
產(chǎn)品貨號:BTN131134
產(chǎn)品規(guī)格:250mL
Percoll是一種常用的低粘度的密度梯度介質(zhì),由直徑在15-30nm的硅膠顆粒組成,顆粒外包被了聚乙烯吡咯烷酮(PVP),為化學(xué)惰性,不會影響細(xì)胞的活性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.Percoll滲透壓很低(<20mosm/kg H2O),粘度也很小,可形成高達(dá)1.3g/ml 密度。
2.采用預(yù)先形成的密度梯度時(shí)可在低離心力(200~1000g)于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)達(dá)到滿意的細(xì)胞分離結(jié)果。
3.離心后能形成1-1.3g/mL的密度梯度,可用于分離各種懸浮的細(xì)胞、線粒體、葉綠體和病毒(可小到70S)。
4.由于Percoll擴(kuò)散常數(shù)低,所形成的梯度十分穩(wěn)定。此外,Percoll不穿透生物膜,對細(xì)胞害,因此廣泛用于分離細(xì)胞、亞細(xì)胞成分、細(xì)菌及病毒,還可將受損細(xì)胞及其碎片與完好的活細(xì)胞分離。
5.Percoll溶液高壓滅菌,必須進(jìn)行不添加鹽或蔗糖。鹽的存在會引起percoll糊化,蔗糖的存在會引起焦糖化。
儲存條件:常溫運(yùn)輸和保存,有效期五年(未開封狀態(tài))。
使用方法:
1.不同濃度(密度)Percoll溶液的制備:先用9 份Percoll與1份 8.5% NaCl或1.5MPBS混合達(dá)到生理性滲透壓,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。
Percoll濃度(%) | 70 | 60 | 50 | 40 | 30 | 20 |
比重g/ml | 1.090 | 1.077 | 1.067 | 1.056 | 1.043 | 1.031 |
2.不連續(xù)密度梯度Percoll層的制備:先將試管壁用牛血清濕潤,除去多余血清,這種預(yù)處理可使逐層疊加的Percoll液平穩(wěn)沿管壁流下,使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置,有時(shí)相鄰兩層Percoll 比重相差不大時(shí),可將Percoll液放入注射器中,小針頭斜面緊貼管壁,任其自然慢慢流下。
3.裝樣:樣品體積和細(xì)胞濃度根據(jù)不同細(xì)胞而異,一般加樣體積不宜過大,細(xì)胞濃度也不可過高,否則會影響細(xì)胞的分離和回收。
4.離心:一般采用離心力為400g,時(shí)間20~25min。由于多層Percoll 之間密度差別不大,因此離心機(jī)加速、降速時(shí)要慢,要平穩(wěn)。
5.取樣:當(dāng)所要分離的細(xì)胞大部分在兩層的界面時(shí),可逐層去除Percoll液后收集界面部位的細(xì)胞;有時(shí)大部分細(xì)胞位于Percoll 層中,則需要逐層收集。收獲含有Percoll液的細(xì)胞經(jīng)2次洗滌后可供培養(yǎng)或檢測用。
分離純化細(xì)胞舉例
1.富含NK活性大顆粒淋巴細(xì)胞(LGL)的純化:按順序由下向上逐層加50%、47.5%、45%、42.5%和40%五種不同密度的Percoll,如用10ml 試管(或塑料管)分離,每層Percoll約1.2~1.5ml,初步從外周血中分離的PBMC細(xì)胞1×108懸于1ml培基中,按要求裝樣、離心和取樣。一般富含NK 殺傷活性的LGL細(xì)胞位于42.5%與45%Percoll界面以及上下二層的Percoll液中。
2.純化淋巴母細(xì)胞和除去死細(xì)胞:分別疊加50%和30%Percoll液。收取經(jīng)PHA(或其它抗原、有絲分裂原)刺激PBMC,或含有較高比例異型的PBMC(如腎綜合征出血熱患者),按要求裝樣、離心和取樣。位于管底的淋巴細(xì)胞為小淋巴細(xì)胞;兩層Percoll之間為淋巴母細(xì)胞,純度和回收率在80%以上,位于30%Percoll表面是死細(xì)胞。收獲淋巴母細(xì)胞可進(jìn)行表型、結(jié)構(gòu)以及功能的研究。
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貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
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HR0257 | 酵母線粒體提取試劑盒 | 50T|100T |
HR0243 | 組織胞核/胞漿分離試劑盒 | 50T|100T |
HR8192 | 細(xì)菌核糖體提取試劑盒 | 50T|100T |
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HR8200 酵母內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒 50T|100T
HR8202 植物線粒體提取試劑盒 50T|100T
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