GL1458 原釩酸鈉溶液

產品簡介
北京百奧萊博供應的原釩酸鈉溶液用于科研目的,原釩酸鈉溶液是我司眾多優質蛋白質研究之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括原釩酸鈉溶液(NaVO4,0.1mol/L)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:原釩酸鈉溶液(NaVO4,0.1mol/L)
產品貨號:GL1458
產品規格:10ml
用途:
廣譜酪氨酸磷酸酶抑制劑,又稱正釩酸鈉
注意事項:
無色溶液。工作濃度,0.1-1mmol/L。
儲存條件:-20℃,36個月
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
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名稱:強RIPA裂解液
貨號:BTN131006
規格:250mL
RIPA裂解液是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等實驗。本產品裂解強度較強,對膜蛋白、胞漿蛋白、核蛋白、胞漿磷酸化蛋白和各種轉錄因子均有很好的效果,本產品含有各種蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制劑,能有效防止各種蛋白酶對目的蛋白的降解。我公司各種RIPA裂解液產品特點見下表:
| 產品名稱 | RIPA裂解液(強) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) |
| 有效裂解成分 | 1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.5% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.25% deoxycholate |
| 裂解強度 | 強 | 中 | 溫和 |
| 對膜蛋白的提取 | 很好 | 較好 | 一般 |
| 對胞漿蛋白的提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 對核蛋白的提取 | 很好 | 較好 | 較好 |
| 胞漿磷酸化蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 細胞核轉錄因子提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 含蛋白酶抑制劑 | 是 | 是 | 是 |
| 含磷酸酯酶抑制劑 | 是 | 是 | 是 |
| 主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP,co-IP |
儲存條件:低溫運輸,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
對于培養細胞樣品:
1. 融解RIPA裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF,使PMSF的zuì終濃度為1mM。
2. 裂解細胞
2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后,細胞就會被裂解。
2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g離心3~5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意:通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升。
對于組織樣品:
1. 把組織剪切成細小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF,使PMSF的zuì終濃度為1mM。
3. 按照每20毫克組織加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g離心3~5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
注意:RIPA裂解液的裂解產物中經常會出現一小團透明膠狀物,屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。在不檢測和基因組DNA結合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續實驗;如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續實驗。如果檢測一些常見的轉錄因子,例如NF-kappaB、p53等時,通常不必進行超聲處理,就可以檢測到這些轉錄因子。
備注:
1.為取得zuì佳的使用效果,盡量避免過多的反復凍融。可以適當分裝后使用。
2.裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品,建議使用BCA蛋白濃度測定試劑盒,不建議使用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
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