WE0227 人類cDNA

產品簡介
人類cDNA由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持,本品用于科研目的,本品質量穩定,價位合理,需要人類cDNA等分子生物學試劑產品的客戶,請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示:包括人類cDNA在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:人類cDNA
英文名稱:Human Placenta cDNA
產品貨號:WE0227
產品規格:100μl(20次反應)
本產品是以人胎盤組織RNA為模板,Oligo(dT)以及Random為引物, 用百奧萊博的高靈敏度的逆轉錄酶反轉錄得到的PCR即用型cDNA,可用于PCR實驗的陽性對照。純度:OD260/280≈1.8
使用方法:
以下舉例為常規PCR反應體系和反應條件,實際操作中應根據模板、引物結構和目的片段大小不同進行相應的改進和優化。
1、PCR反應體系:
| 試劑 | 50μl體系 | 終濃度 |
| 10×Taq PCR Buffer with Mg2+ | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,2.5 mM each | 4μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Human Placenta cDNA | 5μl | |
| Taq DNA Polymerase,2.5 U/μl | 0.5μl | |
| RNase-Free Water | 補水至50μl |
注意:
1)引物濃度請以終濃度0.1-1.0μM作為設定范圍的參考。擴增效率不高的情況下,可提高引物的濃度;發生非特異性反應時,可降低引物濃度,由此優化反應體系。
2)鎂離子濃度請以終濃度1.5-3 mM作為設定范圍的參考。本產品的10×PCR Buffer中已經含有15 mM鎂離子,可根據丌同的引物對和模板來調節鎂離子濃度,由此優化反應體系。
2、將混合好的液體進行PCR反應。
3、結果檢測:反應結束后取5μl反應產物,加入適量上樣緩沖液后進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。
儲存條件:-20℃,避免反復凍融
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名稱:Klenow 片段(3"→5" exo-)
貨號:SV0957
規格:1KU|1KU|200U|100U
特性:
用隨機引物制備探針
隨機引物法標記
cDNA 第二條鏈的合成
概述:
Klenow 片段(3′→5′ exo-)是 DNA 聚合酶 I 的 N 末端截短物,它保留了 DNA 聚合酶活性,但失去了 5′→3′ 核酸外切酶活性。該酶經突變(D35,E357A)去除了其 3′→5′ 的核酸外切酶活性(1)。
來源:
重組 E. coli 菌株,其攜帶的質粒上含有 E.coli polA (D35,E357A)基因的片段,片段起始位置在密碼子 324 處。
濃度:
5,000 和 50,000 units/ml。
熱失活:
75℃ 20 分鐘。
使用注意事項:
Klenow 片段(3′→5′ exo-)因去除了 3′→5′ 核酸外切酶的活性,故不適用于生成平末端的反應。
名稱:快速末端平齊化 試劑盒
貨號:SV1006
規格:100次|20次
特性:
30 分鐘內可完成限制性內切酶消化后 DNA 的末端平齊化
即用型預混液在室溫即可進行反應
適用于限制性內切酶消化后的 DNA,已剪切或霧化的 DNA 或 PCR 產物
概述:
快速末端平齊化試劑盒將不匹配的 DNA 5′ 或 3′ 突出末端轉變為帶有 5′ 磷酸的平末端,以便有效地與平末端 DNA 克隆載體連接。用 T4 DNA 聚合酶(M0203)使 DNA 末端平齊化,該酶同時具有 3′ →5′ 外切酶活性和 5′ →3′ 聚合酶活性。酶混合液中的另一成分是 T4 多聚核苷酸激酶(M0201),可將平末端 DNA 的 5′ 端磷酸化,以用于與克隆載體的連接反應。本試劑盒經過優化,可在單次反應中將 5 μg 的 DNA 末端平齊化。
應用:
? 對已剪切、霧化、或經限制性內切酶消化的 DNA 進行末端平齊化,便于與質粒、cosmid、fosmid 和 BAC 載體連接
? PCR 產物在進行平末端克隆前進行末端平齊化
快速末端平齊化TM試劑盒組份
- 平齊化酶混合液
- 10X 平齊化反應緩沖液
- 1 mM dNTP 混合液
質保聲明:
快速末端平齊化試劑盒經過嚴格的質控檢測,確保該產品具有zuì高的活性和純度。詳情請聯系我們咨詢。
熱失活:
70℃ 加熱 10 分鐘。
注意事項:
PCR 產物在進行末端平齊化之前必須純化,可采用商業純化試劑盒、酚抽提/乙醇沉淀法或者凝膠電泳的方法純化 DNA。經限制性內切酶消化的 DNA 無需純化可直接進行末端平齊化反應。
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
| WE0222 | RNA酶清除劑 | 100ml |
| SV0882 |
o | 500次(50μl體系)|100次(50μl體系) |
| SV1173 | ΦX174 病毒 DNA | 250μg|50μg |
| SV1443 | 50 ml 磁性分離架 | 4孔(50ml) |
| SV1570 | CDK1-細胞周期蛋白 B | 1KU|200U |
| SV1607 | CoA-Biotin | 50 nmol |
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