SY0034 熱啟動PCR Master Mi
- 產品/服務：SY0034 熱啟動PCR Master Mi
- 型 號：SY0034
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-06
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：887
產品簡介
北京百奧萊博供應的熱啟動PCR Master Mix(含染料)僅用于生物化學研究方面，我公司專注于核酸擴增(PCR)產品的研發、生產和供應，為您提供的熱啟動PCR Master Mix(含染料)質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示：包括熱啟動PCR Master Mix(含染料)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：熱啟動PCR Master Mix(含染料)
英文名稱：HotStart PCR Master Mix (With Dye)
產品貨號：SY0034
產品規格：1ml×5
HotStart PCR Master Mix是即用型的PCR預混合溶液，含有HotStart DNA Polymerase，dNTP以及優化的緩沖體系，只需加入引物和模板即可進行擴增，大大簡化實驗的操作步驟，提高了高通量操作和實驗結果的重現性。Mix中加入電泳緩沖液和染料，使得PCR產物可以直接進行電泳，染料的存在不會干擾擴增效率。體系中含有的保護劑使得Mix經過反復凍融后仍可維持酶的活性以及產品的穩定性。PCR產物具有3’-dA突出端，可輕松克隆至T載體。
活性定義：用活性化的大馬哈魚精子作為模板/引物，在74oC，30min內攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個活性單位（U）。
質量控制
核酸外切酶殘留檢測：20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 oC下孵育1小時，DNA的電泳譜帶不發生變化。
核酸外內酶殘留檢測：20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 oC下孵育1小時, DNA的電泳譜帶不發生變化。
大腸桿菌殘留DNA檢測: 50 μl體系中，以ddH2O為模板，擴增E.coil 16s rDNA基因。35個循環后擴增產物進行1% 瓊脂糖凝膠電泳，EB染色，無擴增條帶。
功能檢測：50 μl體系中，以30 pg人基因組DNA為模板擴增α-1-antitrypsin基因。35個循環后取10% PCR產物進行1% 瓊脂糖凝膠電泳，EB染色，觀察到單一的360 bp條帶。
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名稱：25mM氯化錳溶液(PCR級MnCl2溶液)
貨號：BTN130307
規格：5mL
本產品為專門用于易錯PCR的MnCl2水溶液，濃度為25mM，可用于調節MnCl2的zuì佳濃度。由于Mg2+在PCR過程中可以穩定非互補的堿基對，Mn2+能夠降低聚合酶對模板的特異性，因而調整兩種離子的濃度，可獲得不同突變頻率的多樣性文庫。
氯化錳分子量為125.8，CAS號為7773-01-5，水合氯化錳外觀為玫瑰色單斜晶體；無水氯化錳外觀為桃紅色結晶。密度為2.977g/cm3。熔點是650℃。在高于熔點溫度下升華。沸點1190℃。易溶于水，溶于醇，不溶于醚。
儲存條件：低溫運輸、-20℃保存，有效期一年。
名稱：一管式反轉錄試劑盒
貨號：BTN170403
規格：10次
本產品是一管式反轉錄預混Mix，內含反轉錄鏈合成所需的所有試劑(MMLV、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反應Buffer等)，用戶只需加入模板 RNA和RNase-Free 水即可進行反應。
產品特點：
1. cDNA的合成更加方便，用戶只需準備模板和水即可進行反應。
2.快捷，操作步驟已經zuì大限度地簡化，能減少污染，降低實驗誤差。
3. 效率高，特殊優化的oligo dT和N6 隨機引物配比，反轉錄效率高。
4. 速度快，只需42℃，20分鐘即可完成cDNA 鏈的合成。
5. 能夠用于GC含量高，二級結構復雜的RNA 模板，合成cDNA片段長度可達12kb。
6. 兼容性好，合成的cDNA可直接用于熒光定量PCR反應，靈敏度高、穩定性好。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| 2×RT MasterMix | 0.1ml |
| RNase-Free 水 | 1ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
1. 解凍后顛倒輕彈混勻各組分，以20μL 體系為例，按下表加入(2×RT Master Mix很粘稠，取用前請短暫離心，并避免吸頭外壁沾附損失)：
| 10μl | |
| Total RNA/mRNA 模板(自備) | 50ng-2μg/5-200ng |
| 補RNase-Free 水到 | 20μl |
注意：對于二級結構很復雜的RNA 模板，推薦使用變性步驟，即在操作步驟之前，將模板RNA在65℃孵育5分鐘后迅速轉移到冰上，再進行下一步操作。
2. 輕輕混勻，42℃孵育20分鐘進行反轉錄反應。
注意：對亍二級結構復雜或者GC含量高的模板，可以提高溫度至50℃，以增強反轉錄效率。
3. 85℃加熱5秒鐘滅活反轉錄酶置冰上備用(更長時間保存請置于-20℃)。
注意事項：
1. 實驗過程中請注意避免RNase污染，防止RNA降解或實驗中的交叉污染。
2. 使用之前請完全溶解并充分混勻，以防因鹽離子濃度丌均影響實驗結果。
3. 使用后應盡快放回-20℃，避免反復凍融。
4. RNA模板的完整性對cDNA合成效率起著決定性作用，因此請選擇可靠的RNA提取/純化方法。
5. 如果擴增片段較長或者RNA結構復雜，為了加強轉錄效果，可以將RNA單獨置于65-70℃加熱5-10分鐘后再加入體系。
6. 操作人員請帶口罩和一次性手套，并經常更換手套。
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