MT0029 Bst DNA/RNA聚合酶3.

北京百奧萊博供應(yīng)的Bst DNA/RNA聚合酶3.0用于科學(xué)研究,我公司的Bst DNA/RNA聚合酶3.0品質(zhì)上佳,經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn),已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
特別提示:包括Bst DNA/RNA聚合酶3.0在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:Bst DNA/RNA聚合酶3.0
英文名稱:Bst DNA/RNA Polymerase 2.0
產(chǎn)品貨號(hào):MT0029
產(chǎn)品規(guī)格:1600U|16000U
本品與Bst DNA 聚合酶(大片段)相比,Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶具有更佳的等溫?cái)U(kuò)增活性和更強(qiáng)的逆轉(zhuǎn)錄活性。無論以DNA還是RNA為模板,Bst3.0 DNA/RNA 聚合酶都具有5’-3’的DNA聚合酶活性和強(qiáng)烈的鏈置換活性,但該酶5’-3’和3’-5’的外切酶活性缺失。 在以RNA為模板的LAMP實(shí)驗(yàn)中,可實(shí)現(xiàn)單酶系統(tǒng)反應(yīng)。該酶在60-70℃之間具有很好的反轉(zhuǎn)錄活性,可有效解決具有二級(jí)復(fù)雜結(jié)構(gòu)的RNA模板的反轉(zhuǎn)錄,而Bst DNA 聚合酶(大片段)無此活性。
產(chǎn)品應(yīng)用:
1.同時(shí)具有較強(qiáng)的延伸能力和逆轉(zhuǎn)錄活性;
2.耐熱性能強(qiáng),對(duì)于復(fù)雜模板的擴(kuò)增活性強(qiáng);
3.強(qiáng)烈的鏈置換活性,可應(yīng)用于LAMP檢測(cè)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.恒溫PCR擴(kuò)增;
2.DNA LAMP和RT-LAMP
3.鏈置換基因合成
4.在60-70度之間具有反轉(zhuǎn)錄活性,可用于單管RT-PCR
產(chǎn)品組成:
| 組分 | 1600U | 16000U |
| Bst DNA Polymerase 3.0(8 U/μl) | 200μl | 2ml |
| 10×Bst Buffer | 1ml×2 | 20ml |
| 100 mM MgSO4 | 500μl | 5ml |
保存條件:-20℃保存,有效期3年。
單位定義:一個(gè)活力單位即在65℃條件下,30分鐘內(nèi)催化25nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。
反應(yīng)實(shí)例:

A:以pEasy質(zhì)粒為模板,應(yīng)用Bst3.0 DNA聚合酶和六對(duì)引物進(jìn)行LAMP實(shí)驗(yàn)(70℃,30分鐘),1-6分別為:模板0、5ng、2.5ng、1.5ng、1ng、0.5ng,M:DNA Marker2000;B:以140ng human RNA為模板,應(yīng)用Bst3.0 DNA聚合酶和六對(duì)引物進(jìn)行LAMP實(shí)驗(yàn)(70℃,30分鐘),1-3:140ng human RNA為模板,4:不加模板,M:M:DNA Marker2000;
以DNA/RNA為模板進(jìn)行LAMP擴(kuò)增反應(yīng)體系配制:
| 加入物 | 加入量 |
| Bst DNA Polymerase 3.0(8 U/μl) | 0.25-1μl |
| 10×Bst Buffer | 2.5μl |
| 100mM MgSO4 | 1.5μl |
| dNTP Mixture(10mM each) | 3.5μl |
| 模板RNA或DNA | 1 ng~1μg |
| *10×LAMP Primer Mix | 2.5μl |
| ddH2O | Up to 25μl |
| 70℃孵育30分鐘~1h。 | |
*10×LAMP Primer Mix:各引物組分: FIP/BIP: 16μM each;Loop F/R: 4μM each; F3/B3: 2μM each
注意事項(xiàng):
1.MgSO4的使用濃度為6~10 mM濃度,1×Bst Buffer中已包含2 mM MgSO4,可自行調(diào)整。
2.有文獻(xiàn)報(bào)道加入Tte Uvrd解旋酶可改善LAMP的效果。
3.使用無模板作為對(duì)照檢測(cè)擴(kuò)增的特異性。
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