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價格：電議
所在地：福建 泉州市
型號：
更新時間：2018-10-16
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公司地址：泉州市泉港區(qū)鐘山路
林經(jīng)理(先生)
| 小鼠催乳素釋放抑制因子elisa檢測試劑盒 |
【產(chǎn)品名稱】 通用名稱：小鼠孕酮（P）定量ELISA檢測試劑盒說明書
英文名稱：Mouse Progesterone （P）ELISA KIT
【包裝規(guī)格】
48 人份/盒，96 人份/盒
【預期用途】 僅供科研使用，定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中小鼠孕酮（P）的濃度。
【檢驗原理】 本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。在預包被抗小鼠孕酮（P）抗體（固相抗體）的微孔酶標板中，加入小鼠孕酮（P）校準品和待測樣本，再加入另一株 HRP 標記的 抗小鼠孕酮（P）抗體（酶標抗體），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結合的組分，在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標抗體的夾心復合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，終轉化為黃色，在酶標儀上測定吸光度（OD值），吸光度（OD 值）與待測樣品中小鼠孕酮（P）的濃度正相關。擬合校準品曲線，可以計 算出樣本中小鼠孕酮（P）的濃度。
【主要成成分】 主要成分
校準品濃度依次為：16、8、4、2、1、0.5 ng/mL。校準品已經(jīng)通過測試，結果表明 HBs抗原陰性，HIV1、HIV2 和 HCV 抗體陰性，由于不存在一種試驗方法能夠完全保證沒有這些物 質，本品必須按照具有潛在的感染性進行處理，處理過程應當遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材
1、能夠檢測 450 nm 吸光度的酶標儀。
2、移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水或去離子水
4、洗瓶或者自動洗板機
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、1L 量筒
7、無粉一次性乳膠手套
8、稀釋用聚丙烯試管
【儲存條件及有效期】
1、2-8℃保存，切勿冷凍，有效期 6 個月。
2、開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自封袋，并將全部試劑放回
2-8℃冰箱。
3、開封后，按照建議的條件保存，校準品、包被微孔板和 HRP 標記抗體，有效期為 28 天， 其他成分在標簽標明的有效期內是穩(wěn)定的。
【適用儀器】
半自動的酶標儀，如 Thermo MK3，或者國產(chǎn)酶標儀。
【樣本要求】 樣本類型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清：4000rpm 條件下離心 20min，去除細胞顆粒和聚合物，上清液保存在-20℃以下，避免反復凍融。
2、血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，4000rpm 條件 下離心 20min，小心地分離出血清，保存在- 20℃以下，避免反復凍融。
3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下，離心 20 分鐘取上 清，血漿保存在-20℃以下，避免反復凍融。
樣本保存和穩(wěn)定性
樣本在 2-8℃條件下，可以儲存 72h，或者在- 20℃儲存 6 個月。樣本收集后，不是一次 檢測完，請按一次用量分裝凍存，避免反復凍融，使用時在室溫下解凍，確保樣品均勻充分 解凍。
【試劑準備】
1、使用前，所有的組分都要至少復溫 30min，確保充分復溫到室溫。
2、濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液，會有結晶產(chǎn)生，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱 使結晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水，按 1:20 稀釋，即 1 份的濃縮洗滌液，添加 19 份的 蒸餾水。
3、底物：底物液 A 和 B，在使用前，按 1:1 體積充分混合，混合后 15 分鐘內使用。
操作程序
1、所有試劑和組分都先恢復到室溫，標準品、質控品和樣品，建議做復孔。
2、按前面試劑準備中描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4、設置標準品孔、樣本孔和空白孔，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL，樣本孔加待測 樣本 50μL，空白孔不加。
5、除空白孔外，標準品孔和樣本孔，加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體 100μL。
6、用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
7、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 20s，甩去洗滌液，吸水 紙上拍干。
8、如此重復 4 次（共洗板 5 次）。若使用自動洗板機，請按洗板機操作程序進行洗板，添加 浸泡 20s 的程序，可以提高檢測的精度。洗板結束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應板。
9、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反 應板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 15min
10、所有孔加入終止液 50μL，在酶標儀上讀取各孔吸光度（OD 值）。
【檢驗結果的解釋】
檢測完成后，以標準品濃度做為縱坐標，對應的吸光度（OD 值）作為橫坐標，利用計算 機軟件，采用四參數(shù) Logistic 曲線擬合（4-pl），創(chuàng)建標準曲線方程，通過樣本的吸光度（OD值），利用方程計算樣品的濃度值。如果樣品被稀釋，通過上述方法測的的濃度值，要乘以稀釋倍數(shù)，才是樣品的終濃度。
小鼠催乳素釋放抑制因子elisa檢測試劑盒
【檢驗方法的局限性】
1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標示的有效期內使用，過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
5、如果樣本值高于標準曲線zui高濃度，請用檢測緩沖液稀釋樣本，并重新檢測。如果細胞
培養(yǎng)上清樣本需要較大的稀釋倍數(shù)，請用細胞培養(yǎng)基進行適度稀釋。
6、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結果，檢測前，請排除該因素。
7、通過其他方法得到的檢測結果，與本試劑盒測定結果不具有直接的可比性。
【產(chǎn)品性能指標】
1、物理性能
試劑盒的各液體組分應澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應真空包裝，無破損漏氣。
2、劑量反應曲線線性校準品劑量反應曲線相關系數(shù) r 值，大于等于 0.9900。
3、度
批內度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進行二十次在同一個板塊內精度評估。 批內變異系數(shù) CV%小于 10%。
批間度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進行二十次在不同板塊內精度評估。批 間變異系數(shù) CV%小于 15%。
4、靈敏度：zui低檢出劑量小于 0.1ng/mL。
5、回收率：三組已知的高、中、低濃度樣品，進行五次回收率評估，回收率在 85%-115%之間。
6、特異性 本試劑盒識別天然和重組小鼠孕酮（P），與結構類似物無交叉。
穩(wěn)定性2℃-8℃保存，有效期 6 個月。
小鼠催乳素釋放抑制因子elisa檢測試劑盒
【注意事項】 生物安全
1、檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴格防止交叉污染，所有樣品、洗棄液和各種廢 棄物都應按照傳染物進行處置。
2、試劑盒的液體組分中，含有 proclin-300 防腐劑，可能引起皮膚過敏反應，避免吸入煙 霧與皮膚接觸。
3、底物液對皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入煙霧。戴上防護手套，實驗完成 后徹底洗手。
4、試劑盒中的終止液為酸性溶液，在使用終止液時，請佩戴防護服，及防護眼睛、手及面 部的設施。
5、本試劑盒用于科學研究，不能用于診斷治療。
6、請不要使用其他批號或其他來源的試劑替代本試劑盒中的試劑。
技術要點
1、重溶或者混合蛋白溶液時，避免起泡。
2、加標準品與樣本時，每個標準品濃度和樣本都要更換移液槍頭，公共組分應該懸臂加樣， 避免交叉污染。
3、合適的溫育時間，和充分的洗滌步驟，是保證實驗結果準確性的必要條件。
4、底物溶液為無色液體，保存過程中變?yōu)樗{色，代表底物溶液已經(jīng)失效，不得使用。
5、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致，加入終止液后，藍色底物產(chǎn)物，會瞬間變?yōu)?黃色。
6、實驗中，用剩的板條，應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
7、所有液體組分，使用前充分搖勻，嚴格按照說明書標明的時間、加樣量及加樣順序進行 溫育操作。
廢物處理 所有使用或未使用的試劑，所有污染性的一次性材料，應當遵循傳染性或潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序，每個實驗室都有責任根據(jù)其實驗的類型和危險性級別，進行廢物和污物的處理， 同時要嚴格依照有關規(guī)定對待所有的廢物和污物。
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