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價格:電議
所在地:上海
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更新時間:2013-03-31
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公司地址: shanghai,jiangzhehu
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曾經(jīng)理(女士)
F81 細(xì)胞,貓腎細(xì)胞 現(xiàn)貨復(fù)蘇凍存
復(fù)蘇細(xì)胞下單后的1-2周內(nèi)到貨,凍存細(xì)胞4-7天內(nèi)到貨。
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細(xì)胞在運(yùn)輸、轉(zhuǎn)移過程中,請勿打開自封袋;拿放細(xì)胞時請持瓶體,切勿在非無菌環(huán)境中碰觸、擰動瓶口封口膜位置
進(jìn)入生物安全柜前,打開自封袋拿出培養(yǎng)瓶,噴上酒精放進(jìn)操作臺(不建議使用酒精棉球擦拭),撕開封口膜后,用酒精燈外焰對瓶口燒灼一圈(3秒左右)
細(xì)胞凍存如下:
1.細(xì)胞:選對數(shù)生長期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時前換液一次。
2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。
3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。
4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。
5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細(xì)胞名稱,凍存日期,以便日后查找。
豎立培養(yǎng)瓶,擰開瓶蓋(如是貼壁細(xì)胞,請用真空泵或吸管移除原配培養(yǎng)基,切勿讓瓶口處的液體回流進(jìn)瓶內(nèi))
更換為含10%-20%血清的完全培養(yǎng)基,嚴(yán)格按照無菌操作要求繼續(xù)培養(yǎng)
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