如骨髓細胞的集落形成試驗和胸腺細胞(脾細胞)的增殖試驗,或用體外培養的依賴細胞因子才能生長的細胞因子依賴株及對細胞因子殺傷敏感的細胞作為靶細胞。ELISA試劑盒細胞因子還能誘導靶細胞表達某些表面分子或分泌一些蛋白質,可以用熒光素標記抗體檢測表達相應分子的細胞數,或用特定方法測定細胞分泌的蛋白質,間接了解細胞因子的活性。其測定方法可分為促進細胞增殖和增殖抑制法、抗病毒活性測定法、集落形成法、趨化作用測定法及細胞因子誘導產物測定法等。前者的增殖細胞數與細胞因子的含量成正比,而后者的增殖細胞數與細胞因子的含量成反比。
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
24ng/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12ng/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6ng/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3ng/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5 ng/L 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
ELISA試劑盒檢測細胞因子促生長活性或抑制生長活性是將不同稀釋度的待測樣品或細胞因子標準品與培養的細胞株共同培養一定時間,然后檢測增殖的細胞數。此外,測定代謝產物熒光強度的方法也可檢測增殖細胞數,如ATP法和cAMP法。






