產品名稱：哺乳動物基因組DNA抽提試劑盒
分類：核酸提取
用途：本試劑盒采用了經典的蛋白酶K處理法，可以抽提到100～150kb以上的基因組DNA。用本試劑盒抽提到的基因組DNA適用于Southern雜交、基因組DNA的PCR擴增及基因組DNA文庫的構建等。
保存：-20℃,避光,12個月
規格說明：
通常使用本試劑盒，從20mg組織可以抽提到約40μg基因組DNA，從106～107Hela細胞可以抽提到約5～50μg基因組DNA。本試劑盒足夠抽提50個常規量的樣品。
注意事項：
1.需自備Tris平衡苯酚、和無水乙醇。
2.如果打算抽提到大片段的基因組DNA，則要盡量避免基因組DNA的物理性剪切。例如避免劇烈振蕩含有基因組DNA的樣品，可以用剪掉槍頭尖的槍頭吸取含有基因組DNA的樣品。
3.不可過分干燥基因組DNA沉淀，否則會極難溶解。
使用方法：
1、樣品收集
1.對于組織樣品：
切下組織，并剪切成小塊，置液氮中凍結，研碎或搗碎。
2.對于貼壁細胞：
胰酶消化后，PBS或生理鹽水洗一次，1000～2000g離心1～2分鐘，棄上清，收集細胞。
3.對于懸浮細胞：
1000～2000g離心1～2分鐘，棄上清，收集細胞。
2、基因組DNA抽提
1.樣品處理完畢后，每1mL樣品裂解液中加入5μL蛋白酶K，混勻。
2.對于上述處理好的樣品，每20mg組織或106～107個細胞中加入500μL添加了蛋白酶K的樣品裂解液，顛倒混勻數次，充分裂解組織或細胞。
3.50℃水浴消化過夜。
4.加入500μL Tris平衡苯酚抽提樣品。
5.吸出酚相及中間相(可以吸除少量靠近中間相的水相液體)，剩余的水相用等體積Tris平衡酚再抽提一次。
6.吸出酚相及中間相(可以吸除少量靠近中間相的水相液體)，剩余的水相用等體積再抽提一次。
7.吸出約300μL上清液，加入60μL 10M醋酸銨和600μL無水乙醇，顛倒數次混勻，此時可見DNA沉淀產生。
8.10000g離心1分鐘，棄上清。加入70%乙醇洗滌DNA沉淀兩次。
9.盡量吸除殘余的乙醇，待看不到明顯的液體時，立即加入50～100μL Nuclease Free Water溶解DNA。
注意：不可過分干燥基因組DNA沉淀，否則會極難溶解。如果發現DNA沉淀難以溶解，可以在4℃用搖床緩慢搖動過夜，以溶解DNA沉淀。
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