中文名稱:伊文思藍染色液(0.5%)
規格:100ml
分類:神經染色
儲存方式:室溫,避光,12個月
產品用途:組織切片染色,測定血腦屏障完整性 、染色區分活細胞、測定血容量
注意事項:主要由依文思藍、磷酸鹽溶液等組成。
產品簡介:
伊文思藍(Evans+Blue)又稱偶氮藍,分子式C34H24N6Na4O14S4,分子量為960.80,CAS號為314-13-6伊文思藍與臺盼藍都是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性和細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色,而死細胞會被染成淡藍色。活細胞因有外排功能而無法被伊文思藍染色,因此可以通過此方法在顯微鏡下區分死細胞與活細胞,但無法區分死亡與壞死。
使用方法:
一、血腦屏障通透性
1.1 取處理后的動物(以小鼠為例),靜脈注射伊文思藍染色液(0.5%),使得小鼠眼睛、皮膚出現藍色。0.5~1h 后處死小鼠,取出目的腦組織。【注意】:伊文思藍染色液的注射用量需要根據動物類型以及體重來決定。
1.2將腦組織置于 1.5ml 離心管中,加入 1ml PBS,迅速用組織勻漿器將腦組織制成勻漿,4℃離心。
1.3取上清,加入等量三,4℃孵育。該步驟亦可采用如下操作:取上清,按上清:丙酮=3:7比例加入丙酮,室溫孵育24h。
1.4 4℃離心15min。
1.5 取上述溶液,用分光光度計測 620 nm下的OD值。同時測定已知不同梯度的標準伊文思藍的OD值,繪制標準曲線。根據標準曲線計算出待測樣品的伊文思藍含量。
二、細胞活力鑒定
2.1 取 100μl 重懸細胞到常規離心管內,加入100μl 伊文思藍染色液(0.5%)輕輕混勻(染色時間可適當延長,但不宜超過 10min)。
2.2吸取少量經過染色后的細胞,用血細胞計數板計數。通常如果要比較地進行定量,每個細胞樣品至少數500個細胞,數出藍色細胞和細胞總數。
細胞存活率計算公式如下: 細胞存活率=(細胞總數-藍色細胞數)/細胞總數×
注意事項:
1、Evans+Blue+Stain對人體有輕微毒性,請小心防護。
2、細胞染色時,注意凋亡小體偶爾也有拒染現象。
3、血腦屏障通透性實驗中,Evans Blue Stain注射量應根據不同動物以及動物的重量調整。
4、好采用低溫冷凍離心機進行離心。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。






