中文名稱:酒石酸酸性磷酸酶染液
細(xì)胞和組織的酸性磷酸酶染色主要由萘酚、六氮化對品紅、亞硝酸鈉等組成,染色后酶活性部位呈紅色。
酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)以萘酚AS-BI為底物,在酸性pH下被酸性磷酸酶水解釋放出磷酸和萘酚,萘酚與重氮鹽偶聯(lián)生成有色產(chǎn)物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。對某些酸性磷酸酶來講,Cu2+、酒石酸根離子和四氯化碳以及醛類也都是抑制劑,Mn2+為該酶的激活劑。多用于新鮮血涂片、細(xì)胞涂片、冰凍切片等。
【產(chǎn)品介紹】抗酒石酸酸性磷酸酶主要存在于正常人肺泡巨噬細(xì)胞等部位的TRAP和存在于細(xì)胞白血病人脾臟TRAP均在細(xì)胞濾泡中,并不釋放入血液,血液中TRAP絕大部分來源于破骨細(xì)胞。因而測量血液中TRAP可以了解破骨細(xì)胞的功能狀態(tài)。
【染色原理】在堿性的緩沖液中,細(xì)胞內(nèi)酸酸性磷酸酶催化底物水解,其生成物進(jìn)而與一種穩(wěn)定的重氮鹽偶聯(lián),生成不溶性的偶氮染料沉淀,當(dāng)?shù)孜镏写嬖诰剖釙r,該反應(yīng)只出現(xiàn)在特異性細(xì)胞中。
【染色結(jié)果】陽性反應(yīng)為鮮紅色或深紅色顆粒,定位胞漿。
【產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)】
① 磷酸酶系列染色液為重氮偶聯(lián)法,染色效-果好,磷酸酶的特異性反應(yīng)沉著于胞漿當(dāng)中,形成紅色或紅棕色的顆粒沉淀。再通過核染色液的復(fù)染色,對比度清晰、分明。
② 染色液無嗅、無味、無刺激、不脫色,不含有毒性的物質(zhì),對人體無傷害。 ③ 操作步驟簡單,只需固定—底物液孵育—復(fù)染三步,省時、準(zhǔn)確、操作簡便。 ④ 染色建議使用水性介質(zhì)-甘油明膠進(jìn)行封片固定。⑤ 該磷酸酶系列染色液均使用進(jìn)口原料,質(zhì)量保證,價格低廉,特別是抗酒石酸酸性磷酸酶染液,為國內(nèi)獨(dú)-家生產(chǎn),物美價廉。
【所需儀器】光學(xué)顯微鏡、玻片、染缸、滴管、秒表、記號筆等。
具體試劑配制及操作:
一、固定液:液體,40ml×1瓶
新鮮血涂片、細(xì)胞涂片或爬片、冰凍切片用固定液固定5~10min。石蠟包埋的切片經(jīng)脫臘后不需要再固定。
二、底物反應(yīng)液(一)、(二)、(三)、(四)的組成及配制:
●底物反應(yīng)液(一)組成及配制
組成:(1)A粉×1支 (2)B液500ul×1支
(3)C粉×1支 (4)D液500ul×1支
配制:臨用前將B液用移液器吸入A粉中充分溶解配成甲液,備用
再將D液移液器吸入C粉中充分溶解配成乙液,備用
zui后將甲液與乙液混合成底物反應(yīng)(一),備用
●底物反應(yīng)液(二)組成及配制:
組成:(1)E粉×1支 (2)F500ul×1支
配制:臨用前將底物反應(yīng)液二的F液移液器吸入E粉中充分溶解配成底物反應(yīng)液(二),備用。
●底物反應(yīng)液(三):G液1ml×1支,備用
●底物反應(yīng)液(四)組成及配制:
組成:(1)H粉×1支 (2)I液500u l×1支
配制:臨用前將I液移液器吸入H粉中充分溶解配成底物反應(yīng)液四,備用






