中文名稱：胰蛋白酶-CaCl2溶液(0.1%)
用途：培養(yǎng)細(xì)胞的消化，或者一些組織的消化
注意事項：無菌溶液，主要由0.25%胰酶或胰蛋白酶、0.1%氯化鈣組成，過濾除菌。
儲存條件：-20℃，12個月
簡介：胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后，小腸內(nèi)的腸肽酶會活化該酶原，形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶，能夠繼續(xù)活化geng多胰蛋白酶原，這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作，它會將蛋白質(zhì)水解為肽，進(jìn)而分解為氨基酸，其zui適溫度約為37℃;主要由0.25%胰酶、0.1%氯化鈣等組成，經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化，或者一些組織的消化，通常室溫下1min左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。
操作步驟(僅供參考)：
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-CaCl2 solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入Trypsin-CaCl2;solution重新消化
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g離心1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化
不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項：
1、盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免失效。
2、在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中，要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時間不宜過長，否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會較差。為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期：12個月有效
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