【規格】:100ml
【分類】:免疫印跡
【保存】:4℃,避光,12個月
【用途】:免疫印跡檢測中的發色底物顯跡,尤其適用于堿性磷酸酶系統。
【檢測原理】:用NBT氧化后,BCIP水解產生靛藍沉淀物。
簡介:
BCIP NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒(BCIP/NBT?Alkaline?Phosphatase?Color?Development) 是一種用于免疫組化顯色、Western等膜顯色和誘導多功能干細胞iPS鑒定等的試劑盒。BCIP/NBT是堿性磷酸酯酶的常用底物,在堿性磷酸酯酶的催化下,BCIP會被水解產生強反, 該產物會和NBT發生反應,形成不溶性的深藍色至藍紫色的NBT-formazan。
BCIP/NBT?Alkaline?Phosphatase?Color?Development̳可用于細胞或組織的堿性磷酸酯酶顯色包括誘導多功能干細胞iPS的鑒定, 也可用于Western等結合有堿性磷酸酯酶的膜的顯色檢測\細胞或組織內源性的堿性磷酸酯酶顯色。
使用方法:
1、對于組織切片或細胞樣品或膜,在與堿性磷酸酯酶標記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適當洗滌液洗滌3～5次,每次3～5min。
2、對于檢測內源性堿性磷酸酯酶的組織或細胞樣品,在適當固定后,也用適當洗滌液洗3～5次,每次3～5min。
3、按照如下比例依次加入各溶液,混勻后即配制成BCIP/NBT染色工作液:
4、洗滌完畢后,去除洗滌液。
5、加入適量BCIP/NBT染色工作液,確保能充分覆蓋樣品。
5、室溫避光孵育5～30min或geng長時間(可長達24小時),直至顯色至預期深淺。
6、去除BCIP/NBT染色工作液,用蒸餾水洗滌1～2次即可終止顯色反應。
7、對于組織切片或細胞樣品,顯色反應終止后,如有必要可以用中性紅染色液(neutral& solution)染色,以便于觀察。對于膜,顯色反應終止后,可以室溫晾干避光保存。
注意事項:
1、BCIP對人體有刺激性,NBT對人體有害,請注意適當防護。
2、操作過程中,盡量避免強光照射。
3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
