凝固血液DNA提取試劑盒說明書
產(chǎn)品編號：BTN71002
規(guī)格：30T/100T
產(chǎn)品及特點：
凝固血液DNA提取試劑盒是百奧萊博開發(fā)的專門提取新鮮或冷凍凝固血液基因組DNA 的試劑盒。本產(chǎn)品具有下列特點:
1.DNA 純凈，OD260/280 在1.8-2.0之間，可直接用于PCR、酶切、雜交等。提取得到的DNA 大小在30-50Kb之間。
2.每mL 新鮮凝固全血DNA 產(chǎn)量為20-50μg左右，每mL凍存的凝固全血DNA產(chǎn)量為2-10μg左右。
3.安全，本試劑盒對人體，無腐蝕性和刺激性氣味。
4.操作快速，整個過程在30分鐘內(nèi)即可完成。
規(guī)格及成分：
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成分 |
30T |
100T |
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溶液A |
15ml |
50ml |
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溶液B |
15ml |
50ml |
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說明書 |
1份 |
1份 |
保存條件：
常溫運輸及保存，有效期一年。
自備試劑：
氯fang、異丙醇、75%乙醇。
使用方法：
1. 65℃預熱溶液A，待其沉淀溶化后，充分混勻，取0.5 mL 加入到10-15mL塑料離心管中并放置于65℃待用。
2. 稱取新鮮凝固血液組織0.5 g 左右(如果是干的血塊，只需要50 mg 左右并需要剪成微小的碎片)，加入到上步的溶液A 中勻漿，直到。勻漿過程中將產(chǎn)生大量泡沫，屬于正常現(xiàn)象。
3. 將勻漿液置于65℃水浴保溫5 分鐘，然后將勻漿液(包括凝固血液碎片)全部轉(zhuǎn)移到新的1.5 mL 塑料離心管中。
4. 12000-15000 g 室溫離心3 分鐘，將上清轉(zhuǎn)移到新的1.5 mL塑料離心管中(上清液的體積一般為300 μL 左右)。
5. 在上清液中加入等體積的溶液B，上下顛倒30秒充分混勻后冰浴5 分鐘。
6. 12000-15000 g 室溫離心3 分鐘，轉(zhuǎn)移上清到新的1.5 mL 塑料離心管中。
7. 加入0.2 mL 的氯fang(自備)，震蕩器上充分振蕩30秒混勻。
8. 12000-15000 g 室溫離心3 分鐘，兩相交界面將有白色膜狀物。小心轉(zhuǎn)移上清到新的1.5 mL 塑料離心管中。
9. 重復7-8 步一次。
10. 加入1 倍體積的異丙醇(自備)，上下顛倒30秒混勻，12000-15000 g 離心5分鐘，棄上清，管底將有微小DNA 沉淀。
11. 沉淀用75%乙醇清洗2 次后，室溫晾干。
12. 加入50-100 μL 自備TE 溶解DNA 沉淀。DNA 即可用于電泳，酶切和PCR等反應(yīng)。
