小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,小鼠ELISA試劑盒37℃10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,小鼠ELISA試劑盒以空白對照孔調零后測各孔O·D值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
實踐過程技巧 1. 操作前應對實驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18 C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
2. 正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導致結果錯誤,實驗重復性差。
2. 手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數不要超過說明書推薦的洗滌次數,洗液在反應孑L內滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,造成孔問污染,導致假陰性或假陽性。
3. 要保證加液量一致ELISA試劑盒我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準,造成顯色不統一,判斷錯誤。
4. 顯色液量不可過多 加樣的工作環境不能處于陽光直射的環境下,加顯色系統后要避光反應,顯色液量不能過多,以免顯色過強。
小鼠Ⅵ型膠原α1(COL6α1)ELISA試劑盒 ,英文名: COL6α1 ELISA Kit
小鼠Ⅴ型膠原α2(COL5α2)ELISA試劑盒 ,英文名: COL5α2 ELISA Kit
小鼠Ⅳ型膠原α1(COL4α1)ELISA試劑盒 ,英文名: COL4α1 ELISA Kit
小鼠Ⅳ型膠原(COL4)ELISA試劑盒 ,英文名: COL4 ELISA Kit
小鼠Ⅲ型前膠原氨基端原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 ,英文名: PⅢNP ELISA Kit
小鼠Ⅲ型膠原交聯羧基端肽(CTXⅢ)ELISA試劑盒 ,英文名: CTXⅢ ELISA Kit
小鼠Ⅲ型膠原(COL3)ELISA試劑盒 ,英文名: COL3 ELISA Kit
小鼠Ⅱ型前膠原羧基端原肽(PⅡCP)ELISA試劑盒 ,英文名: PⅡCP ELISA Kit
小鼠Ⅱ型前膠原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA試劑盒 ,英文名: PⅡNT ELISA Kit
小鼠Ⅱ型膠原交聯羧基端肽(CTXⅡ)ELISA試劑盒 ,英文名: CTXⅡ ELISA Kit
小鼠Ⅱ型膠原(COL2)ELISA試劑盒 ,英文名: COL2 ELISA Kit
小鼠ⅡD組磷脂酶A2(PLA2G2D)ELISA試劑盒 ,英文名: PLA2G2D ELISA Kit
小鼠ⅡA組磷脂酶A2(PLA2G2A)ELISA試劑盒 ,英文名: PLA2G2A ELISA Kit
小鼠Ⅰ型前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試劑盒 ,英文名: PⅠCP ELISA Kit
小鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA試劑盒 ,英文名: PⅠNP ELISA Kit
小鼠Ⅰ型前膠原(PCⅠ)ELISA試劑盒 ,英文名: PCⅠ ELISA Kit
小鼠Ⅰ型膠原交聯羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒 ,英文名: CTXⅠ ELISA Kit
小鼠Ⅰ型膠原交聯氨基端肽(NTXⅠ)ELISA試劑盒 ,英文名: NTXⅠ ELISA Kit
小鼠Ⅰ型膠原α2(COL1α2)ELISA試劑盒 ,英文名: COL1α2 ELISA Kit
小鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒 ,英文名: COL1α1 ELISA Kit
小鼠Ⅰ型膠原(COL1)ELISA試劑盒 ,英文名: COL1 ELISA Kit
小鼠90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP90β1 ELISA Kit
小鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP90αA1 ELISA Kit
小鼠8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒 ,英文名: 8-OHdG ELISA Kit
小鼠70kDa熱休克蛋白8(HSPA8)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPA8 ELISA Kit
小鼠70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPA5 ELISA Kit
小鼠70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPA1A ELISA Kit
小鼠60kD熱休克蛋白(HSPD1)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPD1 ELISA Kit
小鼠5羥色胺轉運蛋白(SERT)ELISA試劑盒 ,英文名: SERT ELISA Kit
小鼠5-羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 ,英文名: 5-HT ELISA Kit
小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒 ,英文名: 5-HIAA ELISA Kit






