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小鼠小膠質瘤細胞培養注意事項

發布時間：2015-09-29瀏覽次數：1773返回列表

　　小鼠小膠質瘤細胞培養注意事項

　　小鼠小膠質瘤細胞當重要的培養污染時，研究者可能試圖消除或控制污染。先，確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母，把污染細胞與其它細胞系隔離開，用實驗室消毒劑消毒培養器皿和超凈臺，檢查HEPA過濾器。

　　高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性，因而，做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養污染的實驗步驟。

　　小鼠小膠質瘤細胞，細胞培養注意事項：

　　1、實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。

　　2、無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。

　　3、小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。

　　4、工作人員應注意自身之安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染之細胞株應特別小心操作，并選擇適當等級之無菌操作臺(至少ClassⅡ)。

　　5、定期檢測下列項目：5.1CO2鋼瓶之CO2壓力5.2CO2培養箱之CO2濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水，每周更換)。

　　6、粉末培養基配制好后(加了血清)，一般在4度盡量不要超過1個月，如在-20度存放時間可長一些，但也不要超過3-4個月，可能對于永生化細胞株來說要求不是太高，細胞嬌弱，放置時間不宜過長。

　　7、開紫外線照射臺的時候，就將培養基、酶、DHANKS液那到室外讓它自然升溫。