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腫瘤耐藥細胞株的建立及鑒定
發布時間：2013-11-04瀏覽次數：1596返回列表
小編就以逐步增加培養基中阿霉素濃度的方法，誘導出一株耐ADM的人源性白血病細胞株為例。
1.細飽培養和阿霉素人工細飽系的建立方法:K562細胞用含10%小牛血清的培養基，
2.生長抑制實臉:采用接入法分別測定抑制50%細胞生長所需的ADM, DNR. HHT. VCR, AMSA, VP-16及Am一C, 5一FU, MTX和DDP等的濃度，耐藥倍致為K562/A02與親代K562的濃度之比。
3.掩蛋白P一170的檢側:采用活細施間接免度熒光法和免皮組織化學法。
4.細胞內藥物濃度側定:采用HPLC法。
5.ndrl和mdr2其因擴增與轉錄的側定:ndrl和.dr2的cDN分別用此切片作探針進行狹縫雜文。
實驗結果
K562IA02細胞系的耐藥謂:用H一TdR接入法分別測定不同藥物的發現K562/A02對ADM的耐藥倍效為60倍。對與ADM的結構及藥理特性相似(DNR)抓取程度不同的較強的耐藥性，表現為典型的多藥耐藥農型。
