高級版會員 第13年
認 證：企業信息已通過認證
主營業務：ATCC 細胞腫瘤細胞,細胞,ATCC 菌種，CMCC 菌種，
- 產品目錄
- 品牌分類
聯系方式
聯系人：李
電話：400-821-8510
手機：15000266580
郵件：xiangfbio@163.com
聯系時,請告知信息來自給覽網
新聞中心
成纖維細胞之人皮膚成纖維細胞操作程序
發布時間：2017-03-08瀏覽次數：3877返回列表
成纖維細胞外增殖能力作為衰老生物學標志，廣泛用于衰老研究，成為衰老研究的重要工具。
人皮膚成纖維細胞操作程序：
1.將手術切取的皮膚(或小兒包皮)置玻璃培養皿內，用含較高濃度抗生素(常用200～300IU青霉素，200～300μg鏈霉素/ml)的Hank′s液清洗2次。用鋒利的眼科剪，盡可能將皮膚上的脂肪與結締組織去除干凈;
2.轉移上述皮膚至另一玻璃培養皿內，用Hank′s液清洗后，吸盡液體。用剪刀將皮膚剪成直徑約1mm大小的組織塊，再用Hank′s液清洗1次，吸干，滴1～2滴小牛血清;
3.將皮膚組織塊接種至涂有鼠尾膠原的玻璃培養瓶(或塑料培養碟)內，每平方厘米面積可接種10～15塊組織;
4.翻轉培養瓶，使有組織塊的一面處于上位，同時加入適量培養液(見材料與設備項)，25ml的培養瓶可加2～3ml，塞緊瓶塞(若CO2孵箱，用螺口培養瓶，此時螺帽不要旋得太緊，以便與外界氣體交流)，置37℃溫箱(或含5%CO2的孵箱);
5.2～4小時后，輕輕翻轉培養瓶，使組織塊浸沒于培養液中;
6.一般不必每天觀察，因為晃動后會影響組織塊的貼瓶與生長。10天左右再觀察，若有污染，棄之;若培養液變黃可換液;
7.通常組織塊于1周左右長出細胞，當細胞長滿瓶底面時可按第二節中描述的方式傳代。
