人胚肺細胞，HLF細胞 素爾細胞庫提供遺傳變異細胞系、正常組織來源細胞系、腫瘤細胞系、工程細胞系、干細胞系，涉及人類，大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。...

素爾細胞庫提供遺傳變異細胞系、正常組織來源細胞系、腫瘤細胞系、工程細胞系、干細胞系，涉及人類，大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。

人胚肺細胞，HLF細胞 

動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)

一節(jié) 大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用簡介

通過大規(guī)模體外培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)哺乳類動物細胞是生產(chǎn)生物制品的有效方法。2060-70年代，就已創(chuàng)立了可用于大規(guī)模培養(yǎng)動物細胞的微載體培養(yǎng)系統(tǒng)和中空纖維細胞培養(yǎng)技術(shù)。近十?dāng)?shù)年來，由于人類對生長激素、干擾素、單克隆抗體、疫苗及白細胞介素等生物制品的需求猛增，以傳統(tǒng)的生物化學(xué)技術(shù)從動物組織獲取生物制品已遠遠不能滿足這一需求。隨著細胞培養(yǎng)的原理與方法日臻完善，動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)趨于成熟。

所謂動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)（large-scale culture technology）是指在人工條件下（設(shè)定ph、溫度、溶氧等），在細胞生物反應(yīng)器（bioreactor）中高密度大量培養(yǎng)動物細胞用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。目前可大規(guī)模培養(yǎng)的動物細胞有雞胚、豬腎、猴腎、地鼠腎等多種原代細胞及人二倍體細胞、cho（中華倉鼠卵巢）細胞、BHK-21(倉鼠腎細胞)、Vero細胞(非洲綠猴腎傳代細胞，是貼壁依賴的成纖維細胞)等，并已成功生產(chǎn)了包括狂犬病疫苗、口蹄疫疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、紅細胞生成素、單克隆抗體等產(chǎn)品。

在過去幾十年來，該技術(shù)經(jīng)有了很大發(fā)展，從使用轉(zhuǎn)瓶(roller bottle) 、CellCube等貼壁細胞培養(yǎng)，發(fā)展為生物反應(yīng)器（Bioreactor）進行大規(guī)模細胞培養(yǎng)。一代細胞培養(yǎng)技術(shù)核心問題是難以產(chǎn)業(yè)化或者說是規(guī)模化生產(chǎn)：一是在工藝生產(chǎn)時不能大規(guī)模制備產(chǎn)品；二是非批量生產(chǎn)容易導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量的不均一性；三是難以對同批生產(chǎn)進行生產(chǎn)和質(zhì)量控制。

人胚肺細胞，HLF細胞 

SUER0479(XR)     HMy2.CIR細胞，人B淋巴母細胞

SUER0480(XR)     hFOB 1.19細胞，人SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞

SUER0481(XR)     H9細胞，人T淋巴系細胞

SUER0482(XR)     HFF-1細胞，人包皮成纖維細胞

SUER0483(XR)     HL / KMB-17細胞，人二倍體系細胞

SUER0484(XR)     CCL-153細胞，人肺成纖維細胞

SUER0485(XR)     HLF-a細胞，人肺細胞

SUER0486(XR)     BB7.2細胞，人分泌A2抗體B淋巴細胞

SUER0487(XR)     L-02細胞，人肝細胞

SUER0488(XR)     QSG-7701細胞，人肝細胞

SUER0489(XR)     LX-2細胞，人肝星形細胞

SUER0490(XR)     THLE-3細胞，人肝永生化細胞

SUER0491(XR)     HL-7702(L-02)細胞，人肝正常細胞

SUER0492(XR)     HCAEC細胞，人冠狀動脈內(nèi)皮細胞

SUER0493(XR)     HLEpiC細胞，人晶狀體上皮細胞

SUER0494(XR)     KB細胞，人口腔表皮樣癌細胞

SUER0495(XR)     DOK細胞，人口腔粘膜癌前病變細胞

SUER0496(XR)     H293T細胞，人類胚胎腎臟表皮細胞

SUER0497(XR)     CRL-1992人 細胞，淋巴母細胞

SUER0498(XR)     FD4細胞，人淋巴與倉鼠肺雜交

SUER0499(XR)     FD6細胞，人淋巴與倉鼠肺雜交細胞

SUER0500(XR)     Hs68細胞，人男性正常龜頭細胞哦

SUER0501(XR)     SV-HUC-1細胞，人膀胱上皮永生化細胞

SUER0502(XR)     HLF細胞，人胚肺細胞

SUER0503(XR)     NRC-5細胞，人胚肺細胞

SUER0504(XR)     HELF 細胞，人胚肺成纖維細胞

SUER0505(XR)     HFL1細胞，人胚肺成纖維細胞

SUER0506(XR)     IMR-90細胞，人胚肺成纖維細胞

SUER0507(XR)     MRC-5-EGFP+puro

SUER0508(XR)     MRC-5細胞，人胚肺成纖維 細胞

SUER0509(XR)     HLF-02細胞，人胚肺二倍體細胞

SUER0510(XR)     WI-38細胞，人胚肺細胞

人胚肺細胞，HLF細胞 

隨著生物技術(shù)的發(fā)展，迫切需要大規(guī)模的細胞培養(yǎng)，特別是培養(yǎng)表達特異性蛋白的哺乳動物細胞，以便獲得大量有用的細胞表達產(chǎn)物。采用玻璃瓶靜置或旋轉(zhuǎn)瓶的培養(yǎng)方法，已不能滿足所需細胞數(shù)量及其分泌產(chǎn)物。因而必須為工業(yè)化生產(chǎn)一種新的技術(shù)方法。自70年代以來，細胞培養(yǎng)用生物反應(yīng)器有很大的發(fā)展，種類越來越多，規(guī)模越來越大，較常見的細胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器有空氣提升反應(yīng)器，中空纖維管反應(yīng)器，無泡攪拌反應(yīng)器及籃式生物反應(yīng)器等。八十年代以來，人們逐漸開始以生物反應(yīng)器培養(yǎng)代替鼠腹水的方法獲得單克隆抗體。

動物細胞是一種無細胞壁的真核細胞，生長緩慢，對培養(yǎng)環(huán)境十分敏感。采用傳統(tǒng)的生物化工技術(shù)進行動物細胞大量培養(yǎng)，除了要滿足培養(yǎng)過程必需的營養(yǎng)要求外，有必要建立合理的控制模型，進行pH和溶氧（DO）的控制。細胞生物反應(yīng)器可通過微機有序地定量地控制加入動物細胞培養(yǎng)罐內(nèi)的空氣、氧氣、氮氣和二氧化碳四種氣體的流量，使其保持的比例來控制細胞培養(yǎng)液中的pH值和溶氧水平，使系統(tǒng)始終處于狀態(tài)，以滿足動物細胞的生長對pH值和溶解氧的需要。如為提高或達到一定的溶氧水平可改變通入培養(yǎng)罐內(nèi)氣體中氧氣和氮氣的比例來實現(xiàn)控制DO值的目的。采用二氧化碳/碳酸氫鈉（CO2/NaHCO3）緩沖液系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液的pH值是一種較好的方法。

現(xiàn)在，由于動物細胞培養(yǎng)技術(shù)在規(guī)模和可靠性方面都不斷發(fā)展，且從中得到的蛋白質(zhì)也被證明是安全有效的，因此人們對動物細胞培養(yǎng)的態(tài)度已經(jīng)發(fā)生了改變。許多人用和獸用的重要蛋白質(zhì)藥物和疫苗，尤其是那些相對較大、較復(fù)雜或糖基化（glycosylated）的蛋白質(zhì)來說，動物細胞培養(yǎng)是的生產(chǎn)方式。60年代初，英國AVRI研究所在貼壁細胞系BHK21中將口蹄疫病毒培養(yǎng)成功后，從初的200ml和800ml玻璃容器開始，很快就放大到30L和100L不銹鋼罐的培養(yǎng)規(guī)模。使用的是基于Eagle's配方的培養(yǎng)基，補充5%成年牛血清和蛋白胨。1967年以后，Wellcome（現(xiàn)為Cooper動物保健）集團分布于歐洲、非洲和南美洲8個的生產(chǎn)廠商，應(yīng)用此項技術(shù)工業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)口蹄疫疫苗和獸用狂犬疫苗，已掌握了5000L的細胞罐大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)。

目前已實現(xiàn)商業(yè)化的產(chǎn)品有：口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗、牛白血病病毒疫苗、脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗、乙型肝炎疫苗、皰瘡病毒疫苗、巨細胞病毒疫苗、α及β干擾素、血纖維蛋白溶酶原激活劑、凝血因子Ⅷ和Ⅸ、促紅細胞素、松弛素、生長激素、蛋白C、免疫球蛋白、尿激酶、激肽釋放酶及200種單克隆抗體等。其中，口蹄疫疫苗是動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)方法生產(chǎn)的主要產(chǎn)品之一。1983年，英國Wellcome公司就已能夠利用動物細胞進行大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)口蹄疫疫苗。美國Genentech公司應(yīng)用SV40為載體，將乙型肝炎病毒表面抗原基因插入哺乳動物細胞內(nèi)進行表達，已生產(chǎn)出乙型肝炎疫苗。英國Wellcome公司采用8000L Namalwa細胞生產(chǎn)α干擾素。英國Celltech公司用氣升式生物反應(yīng)器生α、β和γ干擾素；用無血清培養(yǎng)液在10000L氣升式生物反應(yīng)器中培養(yǎng)雜交瘤細胞生產(chǎn)單克隆抗體。美國Endotronic公司用中空纖維生物反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)動物細胞生產(chǎn)出免疫球蛋白G、A、M和尿激酶、人生長激素等

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