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北京協和醫院感染內科李太生等歷時10年完成的一項大規模健康人群免疫功能研究，在上次揭示了健康人群免疫功能指標（即外周血淋巴細胞亞群）的各年齡段正常參考值范圍以及其隨年齡變化趨勢。

論文日前發表在衰老領域影響因子排名一的《衰老（Aging）》雜志上，被認為是淋巴細胞亞群研究在人類健康領域的又一重要應用。

在“十二五”重大科技支撐項目基金資助下，課題組按照衛生組織定義的“健康”標準，從2006年以來在該院門診及病房進行健康查體的人群中，篩選出年齡在18歲～80歲之間的1068位健康人，分為青年（18歲～44歲）、中年（45歲～64歲）、老年（65歲以上）三個年齡組，進行外周血淋巴細胞及其亞群的11項檢測。在檢測人的T細胞、B細胞及NK細胞等三大類淋巴細胞的基礎上，進一步測出被稱為“免疫系統指揮中樞總司令”的CD4細胞總數及其“屬下各兵種”純真亞群、記憶亞群、功能亞群、激活亞群及凋亡亞群等的具體數值，為判斷個體免疫功能是否“早衰”提供了參考值。

研究發現，隨年齡增長，人體B細胞及NK細胞未見明顯波動。T淋巴細胞總數從1403個單位降至1198個單位，意味著免疫功能下降。

CD4細胞總數變化不大，青年組、中年組、老年組CD4均值分別為690、708、698。但受CD4指揮的兩大軍種，“現役部隊”——記憶細胞總數和“民兵預備役”——純真細胞總數卻呈現明顯的此消彼長態勢。其中，純真細胞均值在青年組、中年組、老年組分別為271、249、226，而記憶細胞的均值在青年組、中年組、老年組分別為419、459、472個單位。

李太生說，這就好比一個遇到突發重大安全事件，如果兵力不夠，就會緊急征調“民兵預備役”入伍轉為“現役部隊”。既往研究證實，機體每遇到外界抗原刺激，就有一部分純真細胞增殖分化為記憶細胞，迅速發揮抵抗病原體功能。根據本研究數據推測，隨著年齡的增長、機體的衰老，更多純真細胞被征調形成記憶細胞，因而純真細胞越來越少，相反記憶細胞越來越多。這就部分解釋了，老年人正是因為缺少了純真細胞的儲備，一旦發生感染很難控制。如果擁有比同齡人更多的純真細胞，則意味著更高的“免疫力儲備”和免疫系統衰老的放緩。

人體淋巴細胞中的抗原遞呈細胞在機體被病原體感染時，會通過一個叫“CD28”的重要輔助信號受體，向CD4傳遞預警信號，由CD4前往執行“轟炸”任務。李太生說，研究還發現，隨年齡增長，人體免疫細胞CD28會越來越少，導致信號傳遞能力衰減，使淋巴細胞不能及時識別和清除外界病原微生物，機體對病原體的抵抗能力下降。這一點解釋了老年人接種疫苗效果差的原因。

李太生說，目前臨床使用的血常規化驗單中，淋巴細胞的正常值參考范圍是一個忽略年齡分化的平均值。舉例來說，套用舊的參考值，老年人的免疫功能顯然會被“低估”。本研究建立的健康人群各年齡段淋巴細胞亞群參考值，將使臨床對人類免疫功能的評價更加。

產品名稱：ChangLiver細胞，ChangLiver細胞株

中文名稱：人張氏肝細胞

來源：肝臟

種屬：人

生長狀態：貼壁生長|懸浮生長|半貼壁

細胞形態：上皮樣|成纖維樣|圓形|球形|梭形|不規則形態

質控：無支原體、無污染|符合標準

周期：凍存細胞3-4個工作日發貨，復蘇細胞1-2周發貨

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ChangLiver細胞，ChangLiver細胞株細胞吹打經驗之談：

急速的反復吹打肯定容易產生泡沫，這對細胞不利，所以我們要盡量避免。在操作時盡量選用較大口的吸管，吸液時先將吸管內空氣排空，再深入液面以下吸液，吹打細胞時，盡量沿著壁吹出液體，操作輕柔，就可zui大程度避免泡沫的產生！

1.有一些細胞可以不用消化液就能夠吹打下來。個人認為能不用消化液是的。譬如巨噬細胞。一直維持巨噬細胞，每次傳代都不用消化液，吹打的時候一般會用瓶內未換的剩余舊培養液，這樣比用新的培養基可以減少點泡沫的生成。當然這個一定要求原培養基未被污染。

2. 吹打的時候我們都知道要一點挨著一點吹，這樣不會漏掉地方。而每次都會先沿著兩條對角線的方向吹打，然后再按照橫著或者是豎著吹打。這樣就可以比較容易把細胞吹下來，因為先細胞的各個方向都受力了，而且比較均勻，細胞比較容易下來，而且對細胞形態的維護比較好。

3.對膠頭滴管的要求。膠頭滴管頭部是做成彎曲45度角的形狀，一般都是自己用止血鉗夾住頭部在酒精燈上燒彎。發現，如果吹打的時候，滴管的頭部邊緣如果是和吹打平面平行的話，反而容易產生泡沫，貼在底部吹，也容易產生泡沫，是能夠有一個角度順著你吹打的方向和滴管一致。并且稍微遠離吹打面，這樣滴管內的液體容易流出，阻力會減小，就不會產生那么多的泡沫了。

4.控制吹打的節奏，急速地吹打會很快地產生泡沫，用力越大，越容易產生。是能夠把握住自己的力度和節奏，有條不紊的吹打。是以自己拿滴管用手的輕松程度為準，如果剛吹幾下很快就累的話，那就證明是節奏過快。吹完都不累的話那就是太慢力度也不夠。一般在吹完一遍時指頭發困會比較好。這樣的節奏能夠比較快速而且有效地完成。

覺得關鍵的操作是不要吹打到底。

培養細胞多年，避免氣泡產生要注意以下兩點：

1 吹打用的培養基不能太少，如果只有1-2mL，氣泡難以避免；

2 吸管每次打出液體后立刻深入液面下吸取液體。

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