生化試劑在實驗中的常識
發布時間：2019-03-14瀏覽次數：1330返回列表
一、在重蒸酚中加入0.1%的8-羥基喹啉及少量巰基乙醇
保存在冰箱中的酚，容易被空氣氧化而變成粉紅色，這樣的酚容易降解DNA，一般不可以使用。為了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羥基喹啉及少量巰基乙醇。8-羥基喹啉是帶有淡黃色的固體粉沫，不僅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性。
二、提細胞基因組DNA時，通常要異戊醇可以降低表面張力，從而減少氣泡產生。另外，異戊醇有助于分相，使離心后的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白相及下層有機溶劑相維持穩定。
三、DNA通常保存在采用TE緩沖液，Tris-HCl的緩沖系統，加入EDTA可以螯合二價金屬離子進而抑制依賴于二價金屬離子的DNA酶的活性，對DNA起到保護作用。
四、蛋白印跡中封閉液的作用：封閉液的作用是封閉未吸附蛋白的部位，以減少非特異性結合背景的影響。常用的封閉液有脫脂奶粉、小牛血清等。
五、簡單的克隆載體必需包括： 復制起點；選擇標記：主要是抗性基因；多克隆位點：便于外源DNA的插入。
六、用酚抽提細胞DNA時的作用： 使蛋白質變性。
七、使用離心機應注意事項 先應該根據自己的實驗需求選擇合適的離心機和轉子以及離心管，使用離心機時的工作轉速不應該超過離心機、轉子以及離心管的zui大允許轉速。離心前注意嚴格 平衡樣品。安裝轉子和轉子蓋要規范、準確。離心時要留人看守，發現離心機異常應立即關閉離心機。離心結束后要安放好轉子。
八、分子生物學實驗室常用的滅菌方法有：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、化學藥劑消毒、過濾除菌
九、在分離DNA過程中，造成DNA分子斷裂的因素有： 核酸酶降解；化學降解；物理剪切。
十、在酶切反應緩沖液中加入BSA提高溶液中蛋白質的濃度，對酶起保護作用。
保存在冰箱中的酚，容易被空氣氧化而變成粉紅色，這樣的酚容易降解DNA，一般不可以使用。為了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羥基喹啉及少量巰基乙醇。8-羥基喹啉是帶有淡黃色的固體粉沫，不僅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性。
二、提細胞基因組DNA時，通常要異戊醇可以降低表面張力，從而減少氣泡產生。另外，異戊醇有助于分相，使離心后的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白相及下層有機溶劑相維持穩定。
三、DNA通常保存在采用TE緩沖液，Tris-HCl的緩沖系統，加入EDTA可以螯合二價金屬離子進而抑制依賴于二價金屬離子的DNA酶的活性，對DNA起到保護作用。
四、蛋白印跡中封閉液的作用：封閉液的作用是封閉未吸附蛋白的部位，以減少非特異性結合背景的影響。常用的封閉液有脫脂奶粉、小牛血清等。
五、簡單的克隆載體必需包括： 復制起點；選擇標記：主要是抗性基因；多克隆位點：便于外源DNA的插入。
六、用酚抽提細胞DNA時的作用： 使蛋白質變性。
七、使用離心機應注意事項 先應該根據自己的實驗需求選擇合適的離心機和轉子以及離心管，使用離心機時的工作轉速不應該超過離心機、轉子以及離心管的zui大允許轉速。離心前注意嚴格 平衡樣品。安裝轉子和轉子蓋要規范、準確。離心時要留人看守，發現離心機異常應立即關閉離心機。離心結束后要安放好轉子。
八、分子生物學實驗室常用的滅菌方法有：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、化學藥劑消毒、過濾除菌
九、在分離DNA過程中，造成DNA分子斷裂的因素有： 核酸酶降解；化學降解；物理剪切。
十、在酶切反應緩沖液中加入BSA提高溶液中蛋白質的濃度，對酶起保護作用。
