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基因擴增儀在腫瘤的研究中發(fā)揮大作用
發(fā)布時間:2014-04-08瀏覽次數(shù):1021返回列表
PCR原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
這種方法的特點是:實驗人員勞動強度大,容易因疲勞引起差錯;而優(yōu)點是:設備簡單,投資少,與自動化基因擴增儀相比,它無須升降溫過程,實驗時間短,試驗接近理想PCR反應條件,事實表明實驗效果還是不錯的,但由于標本試管從一個水浴箱往另一個水浴箱移動中要較短暫暴露于空氣中,因此如移動速度不夠快時也會對標本形成溫度干擾,影響結果。本方法的另外一些缺點包括只能局限三個溫階、液體污染以及在低氣壓地區(qū)水溫難以燒到94℃變性溫度等。
基因擴增儀在腫瘤的研究中發(fā)揮大作用
1.獨有的瞬時斷電保護功能:瞬時停電后本儀器可提醒用戶繼續(xù)試驗。
2.良好的線性范圍、靈敏度、重復性:線性范圍廣、可檢測的樣品濃度線性范圍101~1010,基因擴增儀靈敏度小分辨率為1拷貝,重復性CV≤2.1%。
3.多樣化的運行方式:基因擴增儀每個程序段數(shù)多達9個;每個程序的步驟多達9個;每個程序的循環(huán)數(shù)多達99個,溫度、循環(huán)等多個參數(shù)的多種修正、調(diào)節(jié)方式,可完全滿足臨床及科研上試驗的要求。
實時熒光定量PCR不但能有效地檢測到基因的突變,而且可以準確檢測癌基因的表達量。目前用此方法進行過端粒酶hTERT基因、慢性粒細胞性白血病WT1基因、腫瘤ER基因、前列腺癌PSM基因、腫瘤相關的病毒基因等多種基因的表達檢測。隨著與腫瘤相關的新基因的不斷發(fā)現(xiàn),熒光定量PCR技術將會在腫瘤的研究中發(fā)揮大的作用。


