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普通基因擴增和PCR的區別
發布時間:2013-12-19瀏覽次數:1256返回列表
PCR是聚合酶鏈式反應的英文縮寫,它是一種基因擴增技術,應用這個技術的儀器叫PCR儀,或者叫基因擴增儀。普通PCR儀是定性的,熒光定量PCR儀可以定量。通常說基因擴增儀是指普通PCR儀。
PCR需要注意以下事項:
1.模板盡量避免含有酶抑制劑!
2.引物保存時間不易過長,要符合引物涉及的原則,在用軟件設計結束后要進行適當的人工處理。引物濃度要合適,太高容易引起錯配及非特異性產物的形成。
3.循環參數一般退火溫度應低于Tm值5℃。先循環數次,然后延伸幾分鐘,再進行循環,有時候可以加大產物的量。
4.酶濃度過高容易導致非特異性產物的形成。
5.離子濃度過高容易導致非特異性產物的增加。
6.dNTP濃度過高會抑制酶的活性。


