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基因擴(kuò)增儀具體的使用方法
發(fā)布時間：2022-04-20瀏覽次數(shù)：2017返回列表
基因擴(kuò)增儀實際上相當(dāng)于一個率的溫控系統(tǒng)，能夠在短時間內(nèi)率的切換PCR酶反應(yīng)所需要的溫度：能夠快速進(jìn)行溫度切換和調(diào)整對于PCR反應(yīng)來說是很重要的，下面小編講講PCR 擴(kuò)增儀使用方法，帶有相關(guān)英文指示步驟的操作：
1.手動/機(jī)械手式水浴基因擴(kuò)增如上圖所示，用三個恒溫水浴箱，分別將三個水浴溫度恒定在三個溫度：PCR的高溫變性溫度（如94℃）低溫復(fù)性溫度（如58℃），適溫延伸溫度（如 72℃）。
再用一個裝有PCR標(biāo)本試管的提籃，用手工在不同溫度的水浴箱中依次水浴，標(biāo)本在每個水浴箱中恒溫的時間用秒表計時。
這種方法的特點是：實驗人員勞動強(qiáng)度大，容易因疲勞引起差錯；而優(yōu)點是:設(shè)備簡單，投資少，與自動化基因擴(kuò)增儀相比，它無須升降溫過程，實驗時間短，試驗接近理想PCR反應(yīng)條件。
事實表明實驗效果還是不錯的，但由于標(biāo)本試管從一個水浴箱往另一個水浴箱移動中要較短暫暴露于空氣中，因此如移動速度不夠快時也會對標(biāo)本形成溫度干擾，影響結(jié)果。
2.自動化控制型定性基因擴(kuò)增儀
與上述水浴式擴(kuò)增儀相比，也有人稱該種擴(kuò)增儀為干式基因擴(kuò)增儀，它是具代表性的擴(kuò)增儀，包括后續(xù)介紹的第三代、第四代都是以第二代為基礎(chǔ)集成了定量檢測部分。
3.終點定量/半定量
第二代的定性PCR只能判斷陰性陽性，而無法評價特定核酸的濃度及定量分析，定量PCR至少能達(dá)到定性PCR無法實現(xiàn)的下列功能： a.潛伏期病毒濃度探測 b.感染程度 c.致病病原體數(shù)量變化測定 d.抗病物療效評估 e.恢復(fù)期病毒載量檢測
4..實時定量PCR
實時定量QPCR儀＋實時熒光定量試劑+通用電腦+自動分析軟件，構(gòu)成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統(tǒng)。
