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非洲豬瘟檢測(cè)熒光定量PCR儀檢測(cè)結(jié)果的判定
發(fā)布時(shí)間:2019-04-23瀏覽次數(shù):24116返回列表
非洲豬瘟(ASF)病由非洲豬瘟病毒(ASFV)引起。 ASFV感染家豬、疣豬和南非野豬。該病通過(guò)健康和患病動(dòng)物之間的直接接觸,或通過(guò)受感染的飼料間接接觸,以及通過(guò)生物載體(軟蜱)進(jìn)行傳播。ASF的發(fā)病有特急性、急性、亞急性和慢性的形式。由于豬感染的病毒的毒力不同,死亡率從0%到100%不等。
非洲豬瘟檢測(cè)屬于重大疫病檢測(cè),要求儀器具有優(yōu)異的性能,無(wú)論是強(qiáng)陽(yáng)性樣品還是弱陽(yáng)性樣品,都需要的篩查到。應(yīng)對(duì)非洲豬瘟疫情,熒光定量PCR檢測(cè)必不可少。
非洲豬瘟檢測(cè)熒光定量PCR儀檢測(cè)結(jié)果的判定:
1、結(jié)果分析條件設(shè)定
實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)閾值設(shè)定原則:閾值線(xiàn)超過(guò)陰性對(duì)照擴(kuò)增曲線(xiàn)的高點(diǎn),且相交于陽(yáng)性對(duì)照擴(kuò)增曲線(xiàn)進(jìn)入指數(shù)增長(zhǎng)期的拐點(diǎn),或根據(jù)儀器噪聲情況進(jìn)行調(diào)整。每個(gè)樣品反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定的域值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)即為Ct值。
2、結(jié)果描述及判定
當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照Ct值≤28.0且出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線(xiàn),陰性對(duì)照無(wú)Ct值無(wú)擴(kuò)增曲線(xiàn)時(shí),實(shí)驗(yàn)成立,實(shí)例參考附錄E。當(dāng)被檢樣品出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線(xiàn)且Ct值≤38.0時(shí),判為非洲豬瘟病毒核酸陽(yáng)性;被檢樣品無(wú)Ct值,判為非洲豬瘟病毒核酸陰性;對(duì)于Ct值>38.0的樣品且出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線(xiàn),應(yīng)重檢,重檢仍出現(xiàn)上述結(jié)果的判為陽(yáng)性,否則判為陰性。


