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MRS培養基的配制如何避免出現異常情況？
發布時間：2017-10-31瀏覽次數：1901返回列表
MRS培養基的配制如何避免出現異常情況？在配制過程中，從一開就要注意，主要從幾點考慮：
一、溶化
一般應放在玻璃器皿或搪瓷齊內.加入蒸餾水,隔水加熱以促其溶解,加熱時應經常攪拌,防止焦結,待其溶解后補足水分。
二、培養基的分裝
大批量配制時使用的自動分配器須經校準和確認.每次使用前后,均要對分配器的管道系統進行沖洗,在分裝無菌培養基前,則要采用無菌硅膠管。
在使用干燥培養基時,先將蒸餾水按定量加入容器中,然后稱取一定量培養基干粉放入水中,靜置10—15min,攪拌,振蕩,或延長時間以促進溶解,一般不要熱,必要時加熱,但時間不宜過長,溫度不宜過高,避免某些營養成分被破壞。
三、校正酸堿度（調節pH）
培養基必須有適當的pH.因此測定pH是培養基配制過程中的重要步驟之一,測定pH的標準溫度為25士2℃.調節pH可用無菌的 1mol/l氫氧化鈉溶液或10%碳酸鈉溶液、1mol/l鹽酸溶液.當調節緩沖液的pH時,宜用6mol/l磷酸或10mol/l氫氧化鉀溶液.滅菌后 的pH會比滅菌前的pH升高或降低,一般高壓滅菌前培養基的pH會比終pH調高0.2左右,滅菌后基本合適。
因此對培養基、緩沖液、試劑在滅菌前后的 pH均進行測定,并記下每次pH的測定結果,有助于積累數據考察每種培養基、緩沖液、試劑對滅菌程序的耐受性,從而指導滅菌前pH的調節。干燥培養基一般已校正過pH,用時也必須再驗證.測定時,一般用指示劑滴入培養基觀察其顏色的變化,或用pH計校正,如與所需pH不符,可用以上的酸或堿液加以校正.調 整pH后要加熱過濾,使培養基澄清。
