當前位置:給覽網 » 公司 » 北京綠百草科技發展有限公司
公司名稱:北京綠百草科技發展有限公司
聯系人:李先生
電話:400-600-6161
手機:13521740814
郵件:pub02@greenherbs.com.cn
地址:北京市昌平區企業墅上區4-3
反相色譜柱ODS柱使用注意事項
發布時間:2017-07-20瀏覽次數:3389返回列表
ODS柱是一種常用的反相色譜柱,也叫C18柱;由于它是長鏈烷基鍵合相,有較高的碳含量和更好的疏水性,對各種類型的生物大分子有更強的適應能力,因此在生物化學分析工作中應用的為廣泛。反相色譜柱ODS柱使用注意事項如下:
1、使用預柱保護分析柱(硅膠在性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度);
2、將樣品溶解在流動相或性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動相或性相近的溶劑中。樣品溶液不應含有任何顆粒物,使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強溶劑(例如,流動相為水,樣品溶劑為甲醇),為達到較好峰形,需要降低進樣量(以250x4.6mm規格為例,小于10μL);
3、在進行分析之前,請使用至少20倍柱體積的流動相沖洗色譜柱,以使色譜柱達到平衡;
4、所有硅膠基質色譜柱使用溫度應低于60℃;
5、流動相使用前必須經脫氣和過濾處理;
6、反相色譜柱ODS柱,保存溶劑通常是含至少30% 有機相的水溶液,也可在常規清洗后直接保存在有機相中;
如果需要長時間儲藏,則需要使用較高比例的有機相(有機相比例至少大于50%);
7、大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍;
8、避免流動相組成及性的劇烈變化;
9、所有流動相,特別是含有緩沖鹽的流動相,當日實驗當日配制;如果使用了前日配制的流動相,請確保流動相pH值沒有變化,并確保流動相沒有長菌。 流動相的pH值取決于您的應用和色譜柱填料類型。我們建議在所有的色譜柱盡量在pH2~8范圍內使用。請盡量避免在常規流動相中使用很高比例的水(>95%)作為流動相,可能會造成保留時間的不穩定或者色譜柱鍵合相的損害;
10、如果使用性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中;
11、氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。
12、在條件允許情況下,使用前按照說明書方法進行柱效測試。以確保色譜柱的正常。
13、在儲存反相色譜柱ODS柱之前,請使用至少20倍柱體積的不帶緩沖鹽的流動相沖洗色譜柱(去除緩沖鹽),再用更強的溶劑沖洗色譜柱(去除強保留成分,反相色譜通常使用甲醇或乙腈),然后使用合適的溶劑儲存色譜柱。






