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古朵生物：ELISA試驗中如何防止產(chǎn)生氣泡
發(fā)布時間：2023-11-23瀏覽次數(shù)：813返回列表
ELISA試驗中如何防止產(chǎn)生氣泡
ELISA實驗過程中，通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍，導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。在做實驗的過程中，有時為了打干凈槍頭里面的液體，很容易產(chǎn)生氣泡。
實驗過程產(chǎn)生氣泡原因及后果：
1.通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍，導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸。
2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一。
3.包被時有氣泡的話，將導(dǎo)致包被不完全實際包被量下降,實驗結(jié)果弱陽性甚至假陰性。
4.封閉時有氣泡的話，將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點的存在，引起非特異性結(jié)合，實驗結(jié)果本底增高，假陽性。
5.加樣時有氣泡的話，抗原抗體不能有效結(jié)合，實驗結(jié)果弱陽性甚至假陰性。
6.加二抗時有氣泡的話，抗原抗體不能有效結(jié)合實驗結(jié)果弱陽性甚至假陰性(競爭法相反。實驗結(jié)果假陽性)。
7.加顯色液時有氣泡的話，實驗結(jié)果顯色不完全。
8.加終止液時有氣泡的話(1、不能完全終止反應(yīng) 2、影響酶標儀比色，OD值增高)
9.洗滌時有氣泡的話，非特異性結(jié)合物不能完全洗去，做無用功。
一般氣泡都是集合在酶標板的孔周圍，導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有用觸摸，使孔內(nèi)反響不均一。
包被時有氣泡的話，將導(dǎo)致包被不徹底實踐包被量下降--弱陽性乃至假陰性。
關(guān)閉時有氣泡的話，將導(dǎo)致很多未結(jié)合位點的存在，引起非特異性結(jié)合--本底增高，假陽性。
加樣時有氣泡的話，抗原抗體不能有用的結(jié)合--弱陽性乃至假陰性。
加二抗時有氣泡的話，抗原抗體不能有用的結(jié)合--弱陽性乃至假陰性(競爭法相反----假陽性)。
加顯色液時有氣泡的話---顯色不徹底。
加停止液時有氣泡的話，1。不能徹底停止反響 2。影響酶標儀比色，OD值增高
洗刷時有氣泡的話，非特異性結(jié)合物不能徹底洗去，做無用功。
防止辦法：
1。加樣時盡量接近孔底(不要觸摸孔底)，用力均勻，不要過快過猛。
2。關(guān)閉時一定要加滿孔，
3。洗刷時一定要加滿孔(重要)，氣泡會浮上來zui終驅(qū)除。手藝洗板時一定要吸干水分并用力拍干。
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