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古朵闡述：植物elisa試劑盒檢測樣本的處理方法
發布時間：2023-11-15瀏覽次數：848返回列表
植物elisa試劑盒檢測樣本的處理方法
植物elisa試劑盒檢測應用雙抗體夾心法測定標本中植物淀粉分支酶SBE水平。用純化的植物淀粉分支酶SBE抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入植物淀粉分支酶SBE，再與HRP 標記的植物淀粉分支酶SBE抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物淀粉分支酶SBE呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品中植物淀粉分支酶SBE濃度。
植物elisa試劑盒檢測的操作步驟：
1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃;
2、設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3、樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加;
4、除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min;
5、棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次;
6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min;
7、每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
植物elisa試劑盒檢測的樣本處理：
1、血清：使用不含熱原和內dusu的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3、細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5、保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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