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ELISA試實驗:直接法測定抗體時為什么要加酶標抗抗體?
發布時間:2023-08-28瀏覽次數:836返回列表
ELISA試實驗:直接法測定抗體時為什么要加酶標抗抗體?
在ELISA試劑盒實驗中,用直接法測定抗體,不能直接用酶符號測定抗體,然后直接加入底物。而要加酶標抗抗體呢?
如果將酶符號應用于待測抗體,直接法比經典法復雜,在探索符號條件時,不能保證抗體因誤操作而失活;酶標二抗目前已較為常見,被規模化生產,購買后使用方便。如果你直接做好了,方法已經優化了,d一抗二抗顯色,總時間加起來,結果不會超過2到3小時。
可以使用直接ELISA法,即抗體包板用來在抗原上標記酶,然后顯色,這與直接方法相比,減少了一步的時間,縮短了時間。然而,直接法和直接法各有優缺點,其要求取決于實驗的具體要求。
1、要檢測的抗體通常是免疫后產生的抗體。其中有免疫功能衰竭、抗體過少等因素存在。酶符號的使用存在許多不確定因素,如在使用酶符號之前無法測量效價的可能性,這會導致不必要的混淆。
2、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)中酶聯抗體與抗體結合后,ELISA試劑盒具有很強的信號放大作用,可使信號擴增一千倍以上,適用于低抗體含量的測定。
3、直接酶標記抗體在篩選出單克隆抗體后可以考慮,但測定系統的建立需要大量的工作。
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