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蘇木素伊紅(HE)染色液的染色原理

發布時間:2023-08-17瀏覽次數:920返回列表

  蘇木素伊紅(HE)染色液的染色原理


  蘇木素(Hematoxylin)和伊紅( Eosin)染色,簡稱HE 染色,是病理學常規制片中基本的染色方法,應用機器廣泛。蘇木精是從原產中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結晶,是一種堿性染色劑,它在被氧化后生成蘇木素,同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)一起使用,能夠使細胞核染色。在病理診斷、教學和科研工作中,常用HE 染色對正常組織和病變組織進行形態結構觀察。對于確定或鑒別病變組織、細胞中出現的某些異常物質與特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶組織化學方法、免疫組織化學方法等也均是在觀察HE 染色組織切片的基礎上進行的。在HE 染色的組織切片中,細胞核呈藍色,細胞漿呈紅色,二者形成鮮明的對比,易于觀察分析。蘇木素伊紅染色試劑盒中,蘇木素染色液采用進口的高純度蘇木精、硫酸鋁鉀、甘油等組成,不含氧.化.汞、甲醇等有害物質,對細胞核染色。其特點:長期保存,不易產生沉淀和金屬; 應用范圍廣,可以用于人、動物、畜牧、水產等領域,可以用于組織石蠟切片、冰凍切片和組織細胞的染色等;蘇木素染色液可以重復使用。

  染色原理:

  1、細胞核染色的原理:

  蘇木素為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA,在DNA雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA 雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。

  2、細胞漿染色的原理:

  伊紅是一種化學合成的酸性染料,在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質,為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的pH 值密切相關。當染液的pH 值在胞漿蛋白質等電點(4.7~5.0)以下時,胞漿蛋白質以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合,使細胞漿著色,呈現紅色。

  3、分化作用:

  染色后,用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在HE 染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使組織與色素分離而退色。經蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進行伊紅染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。

  4、返藍作用:

  分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態,呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態,呈藍色。組織切片經酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,故分化之后,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍,但所需時間較長。

  注意事項:

  1、切片脫蠟應盡量干凈。

  2、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇應經常換新液。

  3、1%的鹽酸乙醇分化液的分化時間應該依據切片厚薄、組織的類別和1%的鹽酸乙醇分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應該足夠,以便徹底清洗酸。

  4、yi醚-乙醇混合固定液是由yi醚和95%乙醇等量混合而得,再加入適量乙酸,密閉保存。

  5、冷凍切片染色時間盡量要短。

  6、促藍液常使用0.2~1%氨水水溶液或Scoot 促藍液或0.1~1%碳酸鋰水溶液。

  7、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

  8、使用場所應通風,并遠離火源。

  蘇木素伊紅(HE)染色液 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區,我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。

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