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古朵闡述：ECC選擇性顯色培養基實驗原理
發布時間：2023-05-16瀏覽次數：852返回列表
ECC選擇性顯色培養基實驗原理
原理
HiCrome ECC顯色培養基使用了HiVeg特別蛋白胨替代動物源特別蛋白胨，使得培養基無BSE/TSE風險。該培養基為鑒別培養基，用于初步鑒定來自食品和環境樣品的大腸桿菌和其他大腸菌群
培養基含兩種顯色原。一種被大腸埃希菌的葡萄糖醛酸酶裂解，產生藍色至紫色菌落，另一種被大腸菌群的半乳糖苷酶裂解，產生玫瑰紅-粉色菌落(1,2)。HiVeg特別蛋白胨和酵母粉提供氮源物質、維生素B和其他必要生長營養素。乳糖提供可發酵的碳水化合物，中性紅為pH指示劑。磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀為培養基的緩沖液。氯化鈉有助于維持滲透壓平衡。
使用前使培養基表面干燥。用0.1%的HiVeg蛋白胨水(貨號MV028)進行1:5或1:10稀釋食品樣品并進行樣品勻漿。將勻漿液0.5ml或1ml用無菌玻璃涂布棒涂布在瓊脂表面并在35-37°C孵育18-24小時。孵育結束后對藍/紫菌落進行計數，并乘以稀釋因子。大腸埃希菌的數目以每g食品為單位報告。
培養基組成 成分 克/升
HiVeg特殊蛋白胨 5.00
酵母粉 3.30
乳糖 2.50
磷酸氫二鈉 3.50
磷酸二氫鉀 1.50
氯化鈉 5.00
顯色混合劑 20.30
中性紅 0.03
瓊脂 15.00
終 pH (25°C) 6.8±0.2
配制
55.83克溶于1000 ml蒸餾水。輕輕加熱使培養基完全溶解。15磅(121℃)高壓滅菌15分鐘。冷卻至50℃。混勻并傾注無菌平皿。培養基可能不透明，不過不影響其性能。
質量控制
粉末外觀：淡粉色均一自由流動粉末。
成膠性：結實，相當于1.5%瓊脂糖凝膠。
制備好的培養基的顏色和透明度：平皿內為粉紅色不透明凝膠。
配比后的pH值：5.58%水溶液(5.58g干粉/100ml水溶液)配好后，pH值自動為6.8 ± 0.2(25°C)。
培養反應
35-37°C培養18-24小時后，觀察培養反應
有機體
生長
菌落顏色
大腸桿菌(ATCC 25922)
旺盛
藍/紫
肺炎克雷伯菌(ATCC 13883)
旺盛
玫瑰紅/粉紅
銅綠假單胞菌(ATCC 27853)
好-旺盛
稻草色
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