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人α1微球蛋白ELISA試劑盒實驗原理
發布時間：2023-04-14瀏覽次數：975返回列表
人α1微球蛋白ELISA試劑盒實驗原理
檢測中樣品的處理：
1.細胞培養物上清：細胞培養物于室溫1000g，離心10分鐘后收集上清，并將標本保存于-20℃，且應避免反復凍融。
2.血清：標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g，4℃離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
3.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑標本采集后30分鐘內于2-8℃,1000g離心15分鐘，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
4.尿液：無菌收集取初尿，離心除去沉淀物，即可用于檢測，要長期保存尿樣，可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存，或加入尿樣冰凍保護液放入-20℃冰箱長期保存。
5.組織勻漿：將組織標本先用PBS洗滌，除去多余血液，勻漿化后放在PBS于-20℃放置過夜，再經過二次反復凍融破膜，5000g，4℃離心5分鐘，取上清即可檢測。注：取樣和樣品處理過程中，防止有毒物質對操作人員的危害，要采取相應的保護措施。
人α1微球蛋白ELISA試劑盒使用原理:
1，ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2，結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
3，在測定時，受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。
4，用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。
5，此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。
6，由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。
人α1微球蛋白ELISA試劑盒注意事項：
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
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