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細胞培養基的分類與選擇技術總結
發布時間：2023-03-01瀏覽次數：849返回列表
培養基是用來供給細胞營養，促使細胞增殖的，也是細胞賴以生長的環境。細胞培養實驗中用量多的就是細胞培養基，雖然細胞培養試驗基本技術大同小異，但是每種細胞的培養條件卻相差甚遠。若偏離某種細胞所需的培養條件，則會導致細胞表達不同的表型。
培養基種類
按照來源分類：在動物細胞體外培養實驗中，可使用天然培養基(Natural Medium)或是合成培養基(Synthetic/Artificial Medium)。
天然培養基：源于動物體液或組織分離提取，營養成分豐富且各項條件與體內環境相似，所以培養效果佳，但是由于來源于動物，成分復雜，且批間差較大。
合成培養基：是由高純度化學成分(無機鹽、氨基酸、維生素、含碳物質等)與純水配置而成，所有成分都是確定，且可知其確切含量的。
合成培養基根據實驗目的又可分為三種：
★ 短時間保存細胞活性
即各類平衡鹽溶液，具有特定的pH和滲透壓;能維持細胞離開生物體后幾小時內的活性。
★ 延長細胞存活時間
即基礎培養基，在平衡鹽溶液中添加各種有機化合物或血清，配合適當的實驗操作條件，可將細胞培養至多代。
★ 特殊功能
即特殊培養基，根據實驗目的-誘導分化、增殖等要求，將基礎培養基額外添加各類因子的特殊培養基。
目前市面上合成培養基種類繁多且使用便利，因此合成培養基目前是使用廣泛的。
培養基一般含有氨基酸、無機鹽、維生素、含碳物質和其他營養元素，每種成分對于細胞存活、代謝等功能都有不同影響，不同細胞系需要的成分含量也不同，因此市面上會存在各類培養基配方。
培養基形式不同，儲存體積、價格、使用方式也各不相同。
因培養基種類繁多，因此，我們簡單列舉了幾種常見基礎培養基為大家進行介紹
1. MEM
Minimal Essential Medium是基本的培養基, 設計之初是為了培養HeLa細胞以及部分哺乳類的成纖維細胞。MEM含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素，適合多種細胞單層生長。以MEM為基礎，Stanner利用Earle's Balanced Salts和非必需胺基酸(NEAA)進一步配制成MEM-Alpha培養基，可廣泛用于哺乳動物細胞的培養。
2. DMEM
Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)是目前常使用的改良式Eagle's培養基。DMEM與MEM含有相同的營養成分，但濃度高出2~4倍。主要用于快速生長的細胞，分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種。DMEM含高濃度的NaHCO3，要用10%的CO?來平衡，當然也可以在較低CO?濃度下使用。
DMEM-高糖(標準型)適合高密度懸浮細胞培養。適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養。
DMEM-低糖(標準型)適于依賴性貼壁細胞培養，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養。
3. RPMI-1640
RPMI-1640營養成分比較簡單，比DMEM少一點糖和谷光甘肽，廣泛應用于許多種正常細胞和腫瘤細胞、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。
4. DMEM：F12
F12培養基成分豐富，含有多種微量元素，和DMEM以1：1結合，稱為DMEM：F12培養基，作為無血清培養基的基礎，以利用了F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養成分為優點。
該培養基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養。為了增強該培養基的緩沖能力，可以在DMEM：F12(1：1)中加入15mMHEPES緩沖液。
5. McCoy's 5A
McCoy's 5A Medium早是用于肉瘤細胞的培養所設計，可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾臟等)的原代細胞的生長。除適于一般的原代細胞培養外，主要用于作組織活檢培養、一些淋巴細胞培養以及一些難培養細胞的生長支持。
6. M-199
M-199培養基由Morgan等人研制，是個具有確定化學成分的細胞培養液，原本是用來研究雞胚原代細胞。除BSS外，含有53種成分，為全面培養基，此培養液必須輔以血清才能支持長期培養。主要用于雞胚成纖維細胞培養。M-199可用于培養多種種屬來源的細胞，并能培養轉染的細胞，廣泛用于病毒學、疫苗生產。
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