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必知干貨| HE染色石蠟切片的制作的七個步驟
發布時間：2023-02-16瀏覽次數：932返回列表
必知干貨| HE染色石蠟切片的制作的七個步驟 設備用具：切片機、恒溫箱、溶蠟箱、玻璃缸、載玻片、蓋玻片、手術刀片、鑷子、包埋盒。 試 劑 ：10%福爾馬林、酒精、二甲-苯、固體石蠟、蘇木-精、酸水、氨-水、酒精伊紅染色劑型、加拿大樹膠 (二)HE染色石蠟切片的制作過程 步驟一：取材與固定： 取動物新鮮組織塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預先配好的固定液中(10%福爾馬林，Bouin氏固定液)使組織、細胞的蛋白質變性凝固，以防止細胞死后的自溶或細菌的分解，從而保持細胞本來的形態結構。 步驟二：脫水透明： 一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑，逐漸脫去組織塊中的水份。再將組織塊置于既溶于酒精，又溶于石蠟的透明劑二甲-苯中透明，以二甲-苯替換出組織塊的中酒精，才能浸蠟包埋。 步驟三：浸蠟包埋： 將已透明的組織塊置于已溶化的石蠟中，放入溶蠟箱保溫。待石蠟完全浸入組織塊后進行包埋：先制備好容器(如折疊一小紙盒)，倒入已溶化的石蠟，迅速夾取已浸透石蠟的組織塊放入其中。冷卻凝固成塊即成。包埋好的組織塊變硬，才能在切片機上切成很薄的切片。 步驟四：切片與貼片： 將包埋好的蠟塊固定于切片機上，切成薄片，一般為5—8微米厚。切下的薄片往往皺折，要放到加熱的水中燙平，再貼到載玻片上，放45℃恒溫箱中烘干。 步驟五：脫蠟 常用HE染色，以增加組織細胞結構各部分的色彩差異，利于觀察。蘇木-精(Hematoxylin，H)是一種堿性染料，可將細胞核和細胞內核糖體染成藍紫色，被堿性染料染色的結構具有嗜堿性。伊紅(Eosin，E)是一種酸性染料，能將細胞質染成紅色或淡紅色，被酸性染料染色的結構具有嗜酸性。染色前，須用二甲-苯脫去切片中的石蠟，再經由高濃度到低濃度酒精，蕞后入蒸餾水，就可染色。 步驟六：染色 HE染色過程是： ①將已入蒸餾水后的切片放入蘇木-精水溶液中染色數分鐘。 ②酸水及氨-水中分色，各數秒鐘。 ③流水沖洗1小時后入蒸餾水片刻。 ④入70%和90%酒精中脫水各10分鐘。 ⑤入酒精伊紅染色液染色2—3分鐘。 步驟七：脫水透明： 染色后的切片經純酒精脫水，再經二甲-苯使切片透明。 步驟八：封固： 將已透明的切片滴上加拿大樹膠，蓋上蓋玻片封固。待樹膠略干后，貼上標箋，切片標本就可使用。 HE染色石蠟切片 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量”的方針
