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人基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒的操作步驟
發布時間：2022-12-29瀏覽次數：943返回列表
人基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒的操作步驟
人基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒采用夾心法酶聯免疫吸附法，用于體外定量分析人血清、血漿、細胞裂解液、唾液、尿液或細胞培養上清中MMP-7的含量。
檢測原理：預先包被的抗體和檢測相抗體都是親和純化級的MMP-7多克隆抗體。檢測抗體經生物su標記。樣品和生物su標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MMP-7呈正相關。
人基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒
基質金屬蛋白酶是依賴鋅和鈣的內肽酶，能夠降解細胞外基質的所有成分。它們在許多生理過程中發揮重要作用，如胚胎發育、組織成型、復制、再生等。它們參與很多病理過程如關節炎、癌癥、心血管疾病。新合成MMPs的量主要由復制水平控制。MMPs的活性主要由酶原的活化和其抑制蛋白質（TIMPs）所調節。MMP-7由正常和疾病組織的上皮細胞分泌。MMP-7可降解一系列基質如Ⅳ型膠原，明膠，彈性蛋白和層聯蛋白。MMP-7還能激活UPA和前MMP-1,2,9。本試劑盒所用標準品為重組人MMP-7，包含250個氨基酸，分子量28KDa。所檢測MMP-7包括酶原和活性酶。
古朵人基質金屬蛋白酶7操作步驟
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照隨貨說明書中圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
人基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨；牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。
