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ELISA試劑盒實驗中抗體效價的檢測方法
發布時間：2022-03-20瀏覽次數：1227返回列表
ELISA試劑盒實驗中抗體效價的檢測方法，在ELISA試劑盒實驗中，抗體的重要性關系到實驗能否成功，但是大多時候很多同學都沒有意識到，或者不知道怎么樣評價抗體的質量，今天我們來了解一下有哪些方法可以檢測抗體的質量，一般來說抗血清質量的評價主要通過一下幾種方法
放射免疫法：以不同稀釋度的抗血清與優質符號抗原混合，孵育24h后，測定其結合率。一般以結合率為50%的血清稀度和為效價。如某抗血清的結合率為50%時的稀釋度為1：15000，則該血清的效價就是1：15000。抗血清的效價，除由抗血清自身的性質決議外，還受符號抗原的質量、孵育時刻，所用稀釋液的成分及其pH等要素的影響，在工作中有必要引起留意。
ELISA試劑盒雙向分散法：使用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上分散，兩者在相交處發生沉積線，以調查和判別抗血清中是否有抗體及其濃度。
球脂板的制備：100ml pH7.1 的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內，于水浴中加溫，攪拌，使瓊脂徹底溶解，趁熱用紗布過濾，待溶液冷卻到65℃左右時，參加疊氮鈉，使其在溶液中的濃度為0.1%。用移液管把瓊脂放在潔凈平皿或玻片上，約3mm厚，待其冷卻，徹底凝固后，用打孔器打孔。中心孔內加適量抗原，周圍各孔內分別參加50μl 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀釋的抗血清，37℃下孵育24h，調查有無沉積線發生，以判別血清的稀釋度。
