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皂苷的鑒別實驗
發布時間：2020-11-25瀏覽次數：1314返回列表
實驗方法原理：皂苷別稱堿皂體;皂素；皂甙；皂角苷；或皂草苷。皂苷是苷元為三萜或螺旋甾烷類化合物的一類糖苷，主要分布于陸地高等植物中，也少量存在于海星和海參等海洋生物中。 許多中草藥如人參、遠志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷還具有抗菌的活性或解熱、鎮靜、抗癌等有價值的生物活性。
1．檢品溶液的制備：
1）取皂角碎塊1g于大試管（或小燒杯）中，加蒸餾水15ml，于30~90°水浴上浸漬15分鐘后過濾，濾液供鑒別用。
2）取薯蕷碎塊0.5g加上法同樣制備得薯蕷水浸液。
3）取薯蕷碎塊0.5g于大試管或小錐形瓶中加95%乙醇10ml于水浴上溫浸15分鐘，濾液供鑒別。
2．鑒別試驗：
（1）溶血試驗：取濾紙片一小塊，于小心處滴加皂角浸液一滴，待干后于同處再滴加一滴，如是反復操作至滴加數滴，干燥后無噴霧血球試液（取牛血、羊血或兔血一份，用玻棒或棉簽攪和，除去凝集的血蛋白，加pH7.4磷酸鹽緩沖液一份稀釋即得），數分鐘后觀察在紅色的背底中是否出現無紅色的黃色（或透明）斑點（中心處皂解浸液原點）。（本反應亦可在試管中進行，血球試液中草藥浸液中的皂苷溶解后，血球液由渾濁變為澄明。此外還可在載玻片上進行，并在顯微鏡下觀察血球破裂溶解前后的狀況）。
（2）泡沫試驗：薯蕷浸液，皂角浸液各2ml，分別置于試管中。用力振搖一分鐘后放置，在10分鐘內觀察二管是否都有持久性泡沫產生？
（3）醋酐濃硫酸試驗（Liebermann-Burchard反應），皂角浸液5ml，于蒸發皿中在水浴上蒸干，加入1ml醋酐使其溶解，滴于干燥比色盤中，從邊沿緩緩滴加濃硫酸1滴，觀察顏色變化。另取薯蕷浸液5ml，置于蒸發皿中，在水浴上蒸干，加入1ml醋酐溶液，并傾入比色盤中，（試管）沿管壁加入幾滴濃硫酸，觀察界面間是否有紫紅色環產生？
（4）氯-仿-濃硫酸試驗（Salkowski反應）：取薯蕷醇浸液2ml，在水浴上蒸干，有氯-仿1ml溶解，轉入干燥小試管中，沿壁小心加濃硫酸1ml，氯-仿層顯紅或蘭色，硫酸層有綠色熒光，示含甾體皂苷。
注意事項：
采用比色法測定總皂苷含量時，標準品可以選擇兩種或兩種以上進行結果對比，取二者的平均值作為zui終測定結果，使結果geng具有意義。測定回收率時，也可以選擇兩種或兩種以上標準品進行對比檢測。
其他：
試驗的操作采用比色法，并選擇酶標儀處理數據，操作簡便快捷，線性關系良好，并減少了用紫外分光光度計法操作時的大量時間，降低了時間對顯色結果的影響，穩定性、精-密度、重復性及回收率均達到標準要求
