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無外泌體血清制備操作步驟！
發(fā)布時(shí)間：2020-10-20瀏覽次數(shù)：1932返回列表
以外泌體為代表的細(xì)胞外囊泡是近幾年研究的熱點(diǎn)，目前的外泌體研究主要通過研究體外培養(yǎng)細(xì)胞來源的外泌體，分析其在體內(nèi)外的功能作用。一般的血清FBS中含有供體細(xì)胞自然分泌的大量Exosomes，而用于Exosome研究的細(xì)胞必須提前geng換無外泌體的血清進(jìn)行培養(yǎng)，以減少對后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的污染。
目前市面上存在著商業(yè)化的無外泌體血清，然而由于其價(jià)格較高等因素，很多研究者選擇自己制備無外泌體血清，而常用的主要是基于超速離心的無外泌體血清分離方法
無外泌體血清制備步驟：
1. 根據(jù)需要處理的血清體積選擇合適的轉(zhuǎn)子與超離管。
2. 在超凈工作臺，將普通血清置于超離管中，配平后，進(jìn)行熱封口。
3. 將封口后的超離管放于離心機(jī)轉(zhuǎn)子中，并加入相應(yīng)適配器然后擰緊轉(zhuǎn)頭蓋。
4. 設(shè)置離心程序：4℃，120,000 ×g，離心18小時(shí)（也有研究者選擇100,000 ×g離心18小時(shí)【2】）。
5. 離心結(jié)束后，回收上清液，為避免污染，在超凈工作臺操作。
6. 收集得到無外泌體血清，并儲存于-20℃中備用。
無外泌體血清產(chǎn)品特點(diǎn)：
1、專為外泌體研究而設(shè)計(jì)；
2、無菌采集的健康胎牛血清過濾法去除外泌體；
3、胎牛血清內(nèi)源外泌體去除率達(dá)97%；
4、過濾法可有效保護(hù)FBS中重要的細(xì)胞營養(yǎng)因子；
5、培養(yǎng)的細(xì)胞生長速率與形態(tài)與普通FBS無差異。
無外泌體血清是一種可由多種細(xì)胞分泌的直徑為30-150nm的膜性小囊泡。經(jīng)研究后發(fā)現(xiàn)，無外泌體血清其內(nèi)含有獨(dú)特的蛋白質(zhì)與核酸分子，無外泌體血清所含成份與其細(xì)胞來源密切相關(guān)，這也決定了無外泌體血清的功能特異性，如抗原提呈、信號傳導(dǎo)或誘導(dǎo)抗腫瘤免疫反應(yīng)、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、細(xì)胞間通信、腫瘤轉(zhuǎn)移等。目前，無外泌體血清研究已經(jīng)成為臨床診斷與基礎(chǔ)醫(yī)生的新熱點(diǎn)。
無外泌體血清關(guān)注市場的動向，才可以geng好的服務(wù)市場，在不斷的挑戰(zhàn)中，追尋夢想，實(shí)現(xiàn)自己的價(jià)值。無外泌體血清發(fā)揮了自己的實(shí)力，挑戰(zhàn)自己，追求的道路上，無外泌體血清geng多的是堅(jiān)持不懈的努力，奮發(fā)向上的積極。無外泌體血清簡便可靠。專業(yè)化知識強(qiáng)，讓無外泌體血清的努力geng好的得到了展現(xiàn)，也是在新的時(shí)代里，無外泌體血清的付出是值得稱贊的
