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半定量RT-PCR和定量RT-PCR的區(qū)別
發(fā)布時間：2020-05-11瀏覽次數(shù)：1782返回列表
標簽：半定量RT-PCR 古朵生物 定量RT-PCR
半定量RT-PCR和定量RT-PCR的區(qū)別
定量PCR較半定量準確，可實時定量。理論上有1個copy的差別就能區(qū)分開。如果你只想看看大致趨勢，半定量不失為一種快速的方法。現(xiàn)在一些別的刊物上還有半定量的結果，如plant cell, plant physiology, genome biology等。
半定量反轉錄-聚合酶鏈反應(semi-quantitatie reerse trans
步驟，1。抽提RNA，2。反轉錄獲得cDNA，3。以cDNA為模板做PCR!
注意：步驟1，RNA抽提質量一定要好，注意污染。內參的選擇，常用的有βactin和GAPDH倆中。步驟3，半定量RT-PCR應該再兩管中進行，既內參和目的基因各一管，這樣便于控制，做圖的時候可以放在一各泳道里跑!指數(shù)期和平臺期一定要摸清楚!
定量RT-PCR(quantitatie reerse trans
(1)由于運用了封閉的檢測，減少了擴增后電泳的檢測步驟，因此也就不能監(jiān)測擴增產物的大小;(2)因為熒光素種類以及檢測光源的局限性，從而相對地限制了real-time Q-PCR的復合式(multiplex)檢測的應用能力;
(3)目前real-time Q-PCR實驗成本比較高，從而也限制了其廣泛的應用。
半定量RT-PCR和定量RT-PCR的區(qū)別上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發(fā)高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量”的方針。
