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6招教你選擇正確的ELISA試劑盒
發布時間：2019-08-02瀏覽次數：1524返回列表
只有正確選用試劑盒，實驗才能變得輕松。市場上的試劑盒品牌諸多，價格各異，質量參差不齊，那么該如何選擇優質的試劑盒呢？只需6招，教你搞定ELISA試劑盒的選擇。
1、明確研究種屬
一般來說，廠家都會在產品名稱上標明種屬，且為個單詞，檢索種屬的常用語言為英文。如下列的 VEGF ELISA 試劑盒（R&D Systems®，貨號 DVE00）的個單詞為 human，即表明目標種屬為人。
R&D Systems® ELISA 試劑盒所涵蓋的種屬，種類達 16 種之多。主要有：人（Human）、小鼠（Mouse）、大鼠（Rat）、豚鼠（Guinea Pig）、犬（Canine）、豬（Porcine）、馬（Equine）、貓（Feline）、牛（Bovine）、棉鼠（Cotton Rat）、病毒（Viral）、恒河猴（Rhesus Macaque）、兔（Rabbit）、肉毒梭菌（C.botulinum）、山羊（Goat）。
（1）一個 ELISA 試劑盒，多個種屬
如果您需對不同物種的同一因子進行定量，建議優先尋找適用于多個種屬的 ELISA 試劑盒，產品介紹中會注明「Multi-species」。如 Endothelin-1 ELISA 試劑盒（R&D Systems®，貨號 DET100）能夠定量檢測人、大鼠、小鼠的細胞培養上清、血清血漿及尿液等樣本中的 Endothelin-1 蛋白。
（2）研究的種屬沒有對應的 ELISA 試劑盒，怎么破？
① 前人摘樹，后人乘涼，看看別人是否驗證過相關種屬。R&D Systems®官網上，在發表文獻（Citation）的下方，有一個篩選框，可查看發表文獻中使用該產品研究的種屬及樣本信息。如 Human IL-6 ELISA 試劑盒（貨號 D6050），在人、大鼠、小鼠、非人靈長類、兔等種屬中均有過實驗記錄，不妨一試。
② 聯系廠家技術部門，獲取目標種屬與試劑盒驗證種屬之間的交叉反應性實驗數據，R&D Systems® 的試劑盒說明書「Specificity」部分，會詳細描述目標因子與相近因子的交叉反應結果，反應性高的，可自行驗證。
③ 聯系廠家定制 ELISA 試劑盒。
④ 如果覺得自己的技術經驗過關，可以選擇抗體對自行開發，不少廠家均提供適用于 ELISA 開發的抗體對（點擊查看 R&D Systems® 抗體對列表）。
2、明確樣本類型
不同廠家驗證樣本類型不同，即使同一廠家不同試劑盒，其驗證樣本類型也不盡相同。特別是復雜的血漿樣本，根據樣本處理方式的差異，分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿，因此購買前需仔細核對。
3、預測目標因子的濃度
一般來說，待測因子可以根據經驗或資料獲得參考的檢測范圍，且正常人與疾病狀態存在差異。如熱門炎癥因子 IL-6，正常人血清中濃度為 3.13 pg/mL，病人會顯著增高，CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。
因而，必要時進行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒其重要。若濃度太低，可選擇高敏試劑盒；若不確定待測濃度或樣本間濃度差異較大，建議使用檢測動態范圍更寬的化學發光法ELISA試劑盒。
如同樣為IL-6 ELISA 試劑盒，各類型檢測范圍差異較大，需要根據實際情況選擇合適的試劑盒：
4、檢查試劑盒進行過哪些質控？
質控數據在說明書中即可找到，在購買前檢查試劑盒是否進行過嚴格的質控實驗。比如 R&D Systems® 的 Quantikine® 系列試劑盒，每一個產品在面市前，均需要經過批次內（Intra-Assay）及批次間（Inter-Assay）的度檢測、摻入回收實驗、線性稀釋實驗及交叉反應測試，從而確保的結果重現性及準確性。
5、確定需檢測的因子數量
如果待測因子超過5個，且樣本量較小時，單因子ELISA檢測方法并不是zui佳選擇。建議考慮多因子檢測方法，如固相芯片（樣本數量一般5個以內，檢測指標可達上百個）及 Luminex 液相芯片方法 (檢測樣本多達 80個，檢測指標多達 50 個）或微流控ELISA檢測系統 Ella。可節約樣本及時間成本，也可保證檢測結果準確。
6、預算評估
預算往往是大家優先考慮的，實際上，不能夠一味講究產品價格，更需要考慮。生物學是其嚴謹的科學，一致性的實驗結果是基金、文章等評審過程中必不可少的因素，即使低廉的價格，不能夠重現結果，也是資源的另一種浪費。
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