當前位置：給覽網(wǎng) » 公司 » 北京中恒日鑫科技有限公司
在線溝通：
- 水質(zhì)分析儀器
- PH檢測儀
- COD檢測儀
- BOD檢測儀
- 電導(dǎo)率檢測儀
- 濁度計
- 氨氮檢測儀
- 總磷總氮
- 余氯總氯檢測儀
- 多參數(shù)水質(zhì)檢測儀
- 其他便攜式水質(zhì)檢測儀
- 試劑/緩沖液/標準液
- 奧立龍電極
- 溶解氧檢測儀
- 在線式水質(zhì)分析儀
- 電磁流量計/液位計
- 微生物過濾系統(tǒng)
- 日本DKK-TOA（東亞電波）
- 水質(zhì)采樣器
- 環(huán)保檢測設(shè)備
- 噪聲檢測儀
- 粉塵檢測儀
- 大氣采樣器
- 空氣采樣泵
- 熱指數(shù)儀
- 流量校準器
- 電子皂膜流量計
- 溫濕度計
- 照度計
- 風(fēng)速儀
- 測煙望遠鏡
- 差壓計
- 風(fēng)量罩
- 塵埃粒子計數(shù)器
- 氣象站
- 公共場所檢測箱
- 微生物采樣器
- 浮游菌采樣器
- 氣溶膠發(fā)生器
- 振動測量儀
- 微波漏能儀
- 定量采樣機器人
- 實驗室儀器設(shè)備
- 電子天平
- 普蘭德移液器
- 測汞儀
- 粘度計
- 紅外測油儀
- 分光光度計
- 重金屬分析儀
- 過濾效率測試儀
- 視力儀器
- 煙氣分析儀/汽車尾氣分析儀
- 室內(nèi)空氣質(zhì)量監(jiān)測儀
- 甲醛檢測儀
- 臭氧檢測儀
- 測氡儀
- 空氣質(zhì)量檢測儀
- 核輻射及安全防護儀器
- 電磁輻射檢測儀
- 射線檢測儀
- 個人劑量報警儀
- 場強儀
- 表面污染測量儀
- 高斯計
- 中子檢測儀
- 活度計
- 無損檢測儀器
- 涂層測厚儀
- 超聲波測厚儀
- 紅外測溫儀
- 表面粗糙度測量儀
- 裂紋測深儀
- 真空計
- 氣體分析及檢測儀
- 一氧化碳檢測儀
- 氧氣檢測儀
- 氨氣檢測儀
- 二氧化硫檢測儀
- 硫化氫檢測儀
- 氯氣檢測儀
- 磷化氫檢測儀
- 可燃氣檢測儀
- 四合一氣體檢測儀
- 復(fù)合式氣體檢測儀
- voc氣體檢測儀
- 單一氣體檢測儀
- 固定式氣體檢測儀
- 有毒有害氣體檢測儀
- 氣體檢測儀傳感器
- 德爾格壓縮空氣質(zhì)量檢測儀
- 氣體檢測管
- 水文水利類儀器
- 流速流量測量儀
- 水位記錄儀
- 水體溫度記錄儀
- 水體采樣器
- 藻類葉綠素熒光測量儀
- 測深儀
- 聲納探測儀
- 電位計
- 土壤類檢測儀器
- 便攜式土壤表層水分儀
- 便攜式土壤剖面水分速測儀
- 土壤水分溫度電導(dǎo)率速測儀
- 呼吸器適合性測試儀
- 口罩密合度檢測儀
- 建筑物理實驗室儀器
- 建筑熱工產(chǎn)品
公司名稱：北京中恒日鑫科技有限公司
聯(lián)系人：汪先生
電話：010-64127897
手機：15101169516(微信同號)
傳真：010-64127897
郵件：15101169516@163.com
地址：北京市通州區(qū)漷興二街4號2幢1層022
液相色譜柱的管理與保養(yǎng)
發(fā)布時間：2018-05-15瀏覽次數(shù)：5396返回列表
色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性,延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱使用時間后就會出現(xiàn)柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化,如不采取措施,將會縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經(jīng)濟損失。因此,有必要加強和規(guī)范色譜柱的管理,從而延長色譜柱的使用壽命。
本文從影響色譜柱使用壽命的幾個因素出發(fā)，從管理的角度，探討色譜柱的維護與保養(yǎng)。
1 色譜柱的類型
常用的色譜柱填充劑有硅膠和化學(xué)鍵合硅膠、離子交換樹脂、凝膠或玻璃微球等填充劑。在化學(xué)鍵合硅膠中以十六烷基硅烷鍵合硅膠常用,辛基硅烷鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用。近年來,由于蛋白質(zhì)等生物大分子物質(zhì)分離提純技術(shù)的飛速發(fā)展,離子交換色譜柱、凝膠色譜柱的應(yīng)用也越來越廣。
2 影響色譜柱使用壽命的因素
2.1 流動相
※在以水溶液為流動相時,水溶液中的微生物例如細菌容易生長,當用水溶液或有機酸緩沖液保護柱子時,一些霉菌可能在色譜柱中滋生,堵塞固定相顆粒間的空隙。
※由于濕法填充技術(shù)的問世,目前普遍使用的色譜柱填料直徑一般都小于10um,流動相中的顆粒雜質(zhì)很容易先沉積在柱頭然后慢慢堵塞柱子。
※流動相的pH值對色譜柱也有影響,特別是對化學(xué)鍵合硅膠填料,水溶液的pH適范圍在2~7.5之間,當pH>8時,硅膠會釋出生成絮狀物堵塞柱子,且難以復(fù)原,柱效很快降低,甚至完全失效。
※當在緩沖液中加入有機溶劑例如甲醇或乙腈時,鹽類的溶解度下降,會析出鹽沉淀,堵塞柱子。同時流動相中的有機溶劑和鹽會腐蝕色譜柱頭的篩板,產(chǎn)生柱頭凹陷。
※流動相的性對柱子也有一定影響,對于硅膠柱,甲醇、水、冰乙酸等性較大物質(zhì)會破壞填料,反之,對于化學(xué)鍵合硅膠,性小的物質(zhì)如正丁醇、二氯甲烷等也起同樣的作用。堿性溶液會破壞陽離子交換樹脂色譜柱,而酸性溶液容易損壞陰離子交換樹脂柱。
2.2 樣品和固定相
※如果有少量或微量的樣品不能夠溶解在流動相中,在通過固定相會堵塞柱子。樣品中的顆粒雜質(zhì)也會堵塞柱子。樣品組分例如糖、蛋白質(zhì)等通過柱子時會產(chǎn)生不可逆吸附,這樣固定相的活性點被覆蓋。
※樣品組分還會與固定相產(chǎn)生反應(yīng),尤其是對于氨基柱的影響較為嚴重,因為氨基易與酐、酮形成希夫(Schiff)縮合而減少活性點,使保留時間縮短。
※色譜柱鍵合相基團脫落、固定相分解和活性基團變性以及會影響柱效和保留時間的顯著改變。大多數(shù)鍵合相都是通過硅氧硅鍵(Si-O-Si)連接在硅基質(zhì)上,形成帶有有機基團的固定相Si-O-Si-R(R為CnH2n+1),硅氧硅鍵可能在水溶液中水解而斷裂,使鍵合基團脫落。
3 液相色譜柱的管理
3.1 色譜柱的管理
※制定色譜柱管理的標準操作規(guī)程并嚴格執(zhí)行。每一根新購進的色譜柱必須造冊登記,內(nèi)容包括:生產(chǎn)公司、品名、型號、規(guī)格、購進時間、啟用時間、單價、柱內(nèi)保護溶液等。色譜柱分類存放,硅膠柱、化學(xué)鍵合硅膠柱、氰基或氨基柱、離子交換樹脂柱、凝膠柱各用一個色譜柱盒,盒上貼上標簽,注明類別。
隨柱說明書裝入密實袋附在登記本上。每啟用一根色譜柱,在色譜柱上貼上標簽,注明啟用日期。
※每根柱子每兩個月保養(yǎng)一次,特別是對于一些使用頻率少的柱子,因為放置時間長,容易干柱,每一次做好保養(yǎng)記錄。
※對于確已失效的柱子,做好停用記錄,不能隨意丟棄,專門存放,如果現(xiàn)用的柱子的填料需要填補,可以用存放的柱子的填料。在從事生產(chǎn)的單位的質(zhì)檢部門,對于使用時間較長柱效降低的柱子,可把它用于檢測產(chǎn)品的中間體。
3.2 色譜柱的保養(yǎng)
※色譜柱使用一段時間后,常遇到柱子被污染,柱效會有一定程度的下降,采用適當?shù)姆椒▽ιV柱進行保護,可以延長色譜柱的使用壽命。
樣品和流動相的處理
※溶解的樣品進樣前用濾膜過濾,以除去不溶物。如果必要,需進行樣品的預(yù)處理。流動相中如有不純物質(zhì)將影響柱效,所以溶劑盡量使用色譜級別的,至少是分析純級別,流動相使用前用微孔薄膜過濾。
※在流動相的輸液管前安裝過濾器。過濾器定期用甲醇超聲清洗,如果效果不好,可用10%的稀硝酸浸泡清洗。對于堵塞嚴重的過濾器,可在火焰上灼燒后再清洗。
保護柱(預(yù)柱)的使用:
※對于較昂貴的色譜柱,可以在柱前加一保護柱,防止樣品中雜質(zhì)污染分析柱,對于制備柱,因其進樣量大,使用保護柱尤為重要。
常規(guī)處理:
※硅膠、氧化鋁、性鍵合相色譜柱每一次用完后用低流速長時間的二氯甲烷或正己烷等溶劑沖洗;鍵合相硅膠色譜柱、離子交換色譜柱和凝膠色譜柱先用蒸餾水沖洗,再用甲醇沖洗,然后用甲醇與蒸餾水以一定比例混合的溶液沖洗后過夜。
※對于已使用一段時間后柱效下降的色譜柱可按以下方法進行再生。
※再生處理包括活化(右→左)和凈化(左→右)兩種。硅膠、氧化鋁、性鍵合相色譜柱按下列順序沖洗:三甲基戊烷或己烷←→三氯乙烷←→乙酸乙脂←→丙酮←→乙醇←→水。鍵合相硅膠柱:蒸餾水←→甲醇(沖洗過程中可加入少量二甲基甲酰胺)。
離子交換樹脂柱:
※高濃度的NaCl溶液(1-2molL的NaCl溶液)可使大部分樹脂再生,油脂等少數(shù)與樹脂緊密結(jié)合的物質(zhì)可用低濃度堿溶液(如0.1molL的NaOH溶液)沖洗,酸性有機物吸附在固定相的用低pH緩沖液沖洗,堿性有機物用高pH緩沖液沖洗,然后再用蒸餾水←→甲醇←→二氯甲烷←→甲醇←→蒸餾水沖洗。
凝膠色譜柱:
※由于凝膠色譜柱是根據(jù)被分離物質(zhì)的分子量大小而分離物質(zhì),通常用稀的氫氧化鈉或非離子型去垢劑(0.2%-1%NP-40或Lubrol)沖洗可除去大部分的結(jié)合物質(zhì),如果一些污染物仍然不能清除時,用24%或30%乙腈沖洗過夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去親水蛋白,用蛋白水解酶處理可分解凝膠中剩余的痕量胃蛋白酶,然后再用蒸餾水←→甲醇←→蒸餾水沖洗。
已污染的色譜柱的處理:
※因保留強的物質(zhì)污染,流動相或樣品中不溶物沉積于柱頭,可用下列方法洗滌:去除脂類可用四氫呋喃、乙腈或甲醇洗滌;去除蛋白質(zhì)可用乙腈、丙醇和1%三lvyisuan進行梯度洗脫;一些高疏水性化合物可用乙腈或甲醇洗脫,同時反復(fù)注入100-200ml的四氫呋喃。
柱頭處理:
※對于柱頭堵塞污染嚴重的情況而且用溶劑沖洗無效的色譜柱,只有打開柱子去除柱頂?shù)奶盍现匮b:先拆下不銹鋼燒結(jié)過濾器,檢查柱床,常見凹陷或受污染的帶色填料,剔去不規(guī)則床層和帶色填料,使柱床顯白色并完全水平,再用甲醇作糊狀填料勻漿液,將糊狀填料勻漿液滴在柱上靠重力從勻漿液中排出甲醇液,重復(fù)直到填料水平。
柱子的貯存:
※先柱子必須清洗干凈后才能貯存,柱子不能貯存在水或水性溶劑中,否則會引起微生物的滋生。
※性色譜柱可用適當溶劑如二氯甲烷沖洗;鍵合相色譜柱用甲醇沖洗;陰離子交換色譜柱用0.002%洗必泰(雙氯苯雙胍己烷)的緩沖液沖洗,陽離子交換色譜柱用0.005%硫柳汞緩沖液沖洗;凝膠色譜柱用緩沖液中加0.02%die氮化鈉或用20%乙醇沖洗。再將柱子兩頭密封,以防止溶劑蒸發(fā)使柱子干燥而引起柱子結(jié)構(gòu)的幾何學(xué)改變。
