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薄層色譜掃描儀的操作方法
發(fā)布時(shí)間:2017-09-12瀏覽次數(shù):4586返回列表
薄層色譜掃描儀應(yīng)用范圍非常廣泛,薄層色譜(TLC)是色譜技術(shù)的種:將固定相涂布于玻璃板上或鋁板上,成均勻薄層,樣品中各組分隨流動相在薄層中定向移動,不同組分和固定性/流動相的作用力不同而實(shí)現(xiàn)了分離。薄層色譜(TLC)是種非常有用的跟蹤反應(yīng)的手段,還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠,它們是性很大(標(biāo)準(zhǔn))或者是非性的(反相)。流動相則是種性待選的溶劑。在5.301中以及大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)中,都將使用標(biāo)準(zhǔn)硅膠板。將溶液中的反應(yīng)混合物點(diǎn)在薄板上,然后利用毛細(xì)作用使溶劑(或混合溶劑)沿板向上移動行展開。下面,我們來介紹下本儀器的操作方法,給大家做個(gè)參考。
薄層色譜掃描儀的操作方法如下:
、向方向研磨混合,去除表面的氣泡后,倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器行涂布(厚度為0.2~0.3mm),取下涂好薄層的玻板,置水平臺上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘,即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。
二、點(diǎn)樣。除另有規(guī)定外,用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上,般為圓點(diǎn),點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm,樣點(diǎn)直徑及點(diǎn)間距離同紙色譜法,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。
三、展開。展開室如需預(yù)用展開劑飽和,可在室中加入足夠量的展開劑,并在壁上貼二條與室樣、寬的濾紙條,端浸入展開劑中,密封室的蓋,使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。 將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5~1.0cm(切勿將樣點(diǎn)浸入展開劑中),密封室蓋,待展開至規(guī)定距離(般為10~15cm),取出薄層板,晾干,按各品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測。
四、如需用薄層色譜掃描儀對色譜斑點(diǎn)作掃描檢出,或直接在薄層上對色譜斑點(diǎn)作掃描定量,則可用薄層掃描法。 薄層掃描的方法,除另有規(guī)定外,可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)點(diǎn)及使用說明,結(jié)合具體情況,選擇吸收法或熒光法,用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多,故應(yīng)在保證供試品的斑點(diǎn)在定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下,將供試品與對照品在同塊薄層上展開后掃描,行并計(jì)算定量,以減少誤差。各種供試品,只有得到分離度和重現(xiàn)性好的薄層色譜,才能獲得滿意的結(jié)果。








